CAJ | 학술논문

目的在肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)上建立钙离子激活钾通道(calcium-activated potassium channel,KCa)电流、电压门控钾通道(voltage-gated potassium channel,Ky)电流和内向整流钾通道(Inward rectifier channel,Ku)电流的记录方法 .方法用急性酶解的方法分离出单个大鼠PASMC,利用全细胞膜片钳方法记录钾电流.结果 ①急性酶解分离得到高质量的单个大鼠PASMC,呈梭形,边界清楚,胞浆均匀透亮.②Kv电流可以被5 mmol/L4-AP明显抑制,使电流-电压关系曲线明显下移,在55 mV时,Kv电流密度从(133.86±7.36)pA/pF减少到(59.09±3.35)pA/pF(n=6,P<0.05).③1 mmol/L TEA对KCa电流有明显抑制作用,使电流-电压关系曲线明显下移,在55 mV时,KCa电流密度从(9.03±1.42)pA/pF减少到(2.12±0.52)pA/pF(n=7,P<0.05).④KATP电流可以被10 μmol/L尼可地尔激活,使电流-电压关系曲线明显上移,在50 mV时,Kv电流密度从(29.08±5.90)pA/pF增加到(88.90±7.98)pA/pF(n=10,P<0.05).结论在肺动脉平滑肌细胞上成功地建立了KCa、Kv和Kir电流的记录方法 ,可以为肺动脉相关疾病的发病机制和治疗方案的探索,提供有效的细胞模型基础.
목적 재폐동맥평활기세포(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)상건립개리자격활갑통도(calcium-activated potassium channel,KCa)전류、전압문공갑통도(voltage-gated potassium channel,Ky)전류화내향정류갑통도(Inward rectifier channel,Ku)전류적기록방법 .방법 용급성매해적방법 분리출단개대서PASMC,이용전세포막편겸방법 기록갑전류.결과 ①급성매해분리득도고질량적단개대서PASMC,정사형,변계청초,포장균균투량.②Kv전류가이피5 mmol/L4-AP명현억제,사전류-전압관계곡선명현하이,재55 mV시,Kv전류밀도종(133.86±7.36)pA/pF감소도(59.09±3.35)pA/pF(n=6,P<0.05).③1 mmol/L TEA대KCa전류유명현억제작용,사전류-전압관계곡선명현하이,재55 mV시,KCa전류밀도종(9.03±1.42)pA/pF감소도(2.12±0.52)pA/pF(n=7,P<0.05).④KATP전류가이피10 μmol/L니가지이격활,사전류-전압관계곡선명현상이,재50 mV시,Kv전류밀도종(29.08±5.90)pA/pF증가도(88.90±7.98)pA/pF(n=10,P<0.05).결론 재폐동맥평활기세포상성공지건립료KCa、Kv화Kir전류적기록방법 ,가이위폐동맥상관질병적발병궤제화치료방안적탐색,제공유효적세포모형기출.