鸡贫血病毒全长基因感染性分子克隆的构建
계빈혈병독전장기인감염성분자극륭적구건
Construction of Infectious Molecular Clone of the Full-Length DNA from CAV
  • 万方数据
    动物医学进展 동물의학진전
    PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
    2011年 8期 6-11 ,共6页

    李秀梅%江丽萍%郭立力%李颖%朱雅宁%石瑜%杨爱华%陈荣荣

    리수매%강려평%곽립력%리영%주아저%석유%양애화%진영영

    鸡贫血病毒%聚合酶链反应%感染性分子克隆%转染 鷄貧血病毒%聚閤酶鏈反應%感染性分子剋隆%轉染
    계빈혈병독%취합매련반응%감염성분자극륭%전염
    PCR法扩增鸡贫血病毒全长基因组,将2个全长基因组顺向连接插入到pBluescriptⅡSK(+)质粒载体中,获得Psk2CAV质粒并转染MDCC-MSB1细胞,盲传4代后,用间接免疫荧光抗体试验(IFA)能检测到特异性荧光.将Psk2CAV质粒DNA于腿部肌肉接种10羽1日龄CAV阴性SPF鸡.剖检结果显示,阳性对照组和Psk2CAV质粒组均有鸡只出现腿肌、胸肌轻微出血,胸腺出现萎缩或出血.组织病理学结果显示,阳性对照组和Psk2CAV质粒组胸腺小叶萎缩,出血、淤血,髓质部萎缩,淋巴细胞减少.通过PCR可以分别从体外感染MDCC-MSB1细胞和体内感染鸡只中扩增到病毒基因片段.本研究证明含有双拷贝CAV的重组质粒Psk2CAV在体内、外均具有感染性,能衍生出病毒,并产生符合自然感染CAV的大体病变和组织病理学变化.
    PCR법확증계빈혈병독전장기인조,장2개전장기인조순향련접삽입도pBluescriptⅡSK(+)질립재체중,획득Psk2CAV질립병전염MDCC-MSB1세포,맹전4대후,용간접면역형광항체시험(IFA)능검측도특이성형광.장Psk2CAV질립DNA우퇴부기육접충10우1일령CAV음성SPF계.부검결과현시,양성대조조화Psk2CAV질립조균유계지출현퇴기、흉기경미출혈,흉선출현위축혹출혈.조직병이학결과현시,양성대조조화Psk2CAV질립조흉선소협위축,출혈、어혈,수질부위축,림파세포감소.통과PCR가이분별종체외감염MDCC-MSB1세포화체내감염계지중확증도병독기인편단.본연구증명함유쌍고패CAV적중조질립Psk2CAV재체내、외균구유감염성,능연생출병독,병산생부합자연감염CAV적대체병변화조직병이학변화.
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