华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2012年
2期
127-131
,共5页
殷涛%魏洪吉%胡晓青%田园
慇濤%魏洪吉%鬍曉青%田園
은도%위홍길%호효청%전완
胰腺癌%骨髓间充质干细胞%肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体%吉西他滨
胰腺癌%骨髓間充質榦細胞%腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體%吉西他濱
이선암%골수간충질간세포%종류배사인자상관조망유도배체%길서타빈
目的 研究TRAIL基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSC)联合吉西他滨对人胰腺癌细胞的杀伤作用.方法 构建重组腺病毒Ad-CMV-TRAIL,体外转染人骨髓间充质干细胞.通过观察绿色荧光的表达强度,确定最佳转染条件.MTT法检测Ad-CMV-TRAIL转染对MSC细胞生长状态的影响.Transwell小室共培养携带TRAIL的MSC和胰腺癌细胞Panc-1,联合应用吉西他滨,AnnexinⅤ-FITC双标法检测凋亡的发生.Western blot法检测Caspase凋亡相关蛋白的表达变化.结果 Ad-CMV-TRAIL以MOI=10体外感染MSC 24 h,显微镜下观察80%以上的MSC表达绿色荧光,转染组细胞高表达TRAIL.Ad-CMV-TRAIL转染之后的MSC仍然可以增殖,活力无明显改变.携带TRAIL的MSC与Panc-1细胞共培养之后,可诱导部分Panc-1细胞发生凋亡,凋亡率达(13.38±3.42)%.而携带TRAIL的MSC与Panc-1细胞共培养之后可以增强吉西他滨的杀伤效果,与单独吉西他滨处理组相比差异显著[(52.10±3.41)% vs.(29.68±1.71)%,P=0.002].Western blot检测结果 显示MSC-TRAIL和吉西他滨共同处理可以诱导凋亡相关的Caspase-8和Caspase-3蛋白活化.结论 MSC可能作为TRAIL的肿瘤靶向载体在胰腺癌的治疗中发挥作用.
目的 研究TRAIL基因脩飾的骨髓間充質榦細胞(MSC)聯閤吉西他濱對人胰腺癌細胞的殺傷作用.方法 構建重組腺病毒Ad-CMV-TRAIL,體外轉染人骨髓間充質榦細胞.通過觀察綠色熒光的錶達彊度,確定最佳轉染條件.MTT法檢測Ad-CMV-TRAIL轉染對MSC細胞生長狀態的影響.Transwell小室共培養攜帶TRAIL的MSC和胰腺癌細胞Panc-1,聯閤應用吉西他濱,AnnexinⅤ-FITC雙標法檢測凋亡的髮生.Western blot法檢測Caspase凋亡相關蛋白的錶達變化.結果 Ad-CMV-TRAIL以MOI=10體外感染MSC 24 h,顯微鏡下觀察80%以上的MSC錶達綠色熒光,轉染組細胞高錶達TRAIL.Ad-CMV-TRAIL轉染之後的MSC仍然可以增殖,活力無明顯改變.攜帶TRAIL的MSC與Panc-1細胞共培養之後,可誘導部分Panc-1細胞髮生凋亡,凋亡率達(13.38±3.42)%.而攜帶TRAIL的MSC與Panc-1細胞共培養之後可以增彊吉西他濱的殺傷效果,與單獨吉西他濱處理組相比差異顯著[(52.10±3.41)% vs.(29.68±1.71)%,P=0.002].Western blot檢測結果 顯示MSC-TRAIL和吉西他濱共同處理可以誘導凋亡相關的Caspase-8和Caspase-3蛋白活化.結論 MSC可能作為TRAIL的腫瘤靶嚮載體在胰腺癌的治療中髮揮作用.
목적 연구TRAIL기인수식적골수간충질간세포(MSC)연합길서타빈대인이선암세포적살상작용.방법 구건중조선병독Ad-CMV-TRAIL,체외전염인골수간충질간세포.통과관찰록색형광적표체강도,학정최가전염조건.MTT법검측Ad-CMV-TRAIL전염대MSC세포생장상태적영향.Transwell소실공배양휴대TRAIL적MSC화이선암세포Panc-1,연합응용길서타빈,AnnexinⅤ-FITC쌍표법검측조망적발생.Western blot법검측Caspase조망상관단백적표체변화.결과 Ad-CMV-TRAIL이MOI=10체외감염MSC 24 h,현미경하관찰80%이상적MSC표체록색형광,전염조세포고표체TRAIL.Ad-CMV-TRAIL전염지후적MSC잉연가이증식,활력무명현개변.휴대TRAIL적MSC여Panc-1세포공배양지후,가유도부분Panc-1세포발생조망,조망솔체(13.38±3.42)%.이휴대TRAIL적MSC여Panc-1세포공배양지후가이증강길서타빈적살상효과,여단독길서타빈처리조상비차이현저[(52.10±3.41)% vs.(29.68±1.71)%,P=0.002].Western blot검측결과 현시MSC-TRAIL화길서타빈공동처리가이유도조망상관적Caspase-8화Caspase-3단백활화.결론 MSC가능작위TRAIL적종류파향재체재이선암적치료중발휘작용.
