中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
8期
1367-1372
,共6页
张世能%庄晓虹%唐健%庄燕妍%黄凤婷%陈文博%程文捷
張世能%莊曉虹%唐健%莊燕妍%黃鳳婷%陳文博%程文捷
장세능%장효홍%당건%장연연%황봉정%진문박%정문첩
胰腺肿瘤%微小RNA%肿瘤侵袭
胰腺腫瘤%微小RNA%腫瘤侵襲
이선종류%미소RNA%종류침습
目的:探讨微小RNA-196a(miR-196a)在胰腺癌细胞系中表达状况及反义miR-196a对人胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响.方法:miR-196a采用实时荧光定量PCR检测.人工化学合成反义miR-196a并转染 PANC-1细胞.CCK-8法检测细胞增殖.流式细胞术检测细胞凋亡情况.通过划痕损伤实验和Transwell小室细胞侵袭、迁移实验检测PANC-1细胞侵袭和迁移能力.构建野生型及突变型核因子κB抑制蛋白α(NFKBIA)3′ UTR的萤光素酶报告载体,检测海肾萤光素酶的相对活性以验证miR-196a对NFKBIA mRNA的作用靶点.结果:人胰腺癌细胞系中miR-196a呈高表达;转染反义miR-196a后,PANC-1细胞miR-196a表达下降,其细胞增殖和凋亡无显著改变(P>0.05);而转染反义miR-196a组中通过Transwell小室的细胞数明显低于各对照组 (P<0.01).与各对照组相比,共转染野生型NFKBIA的3′ UTR和反义miR-196a可使海肾萤光素酶相对活性显著提高.结论:miR-196a可能是癌微RNA(oncomiR)之一,有望成为人胰腺癌基因治疗的候选靶点.
目的:探討微小RNA-196a(miR-196a)在胰腺癌細胞繫中錶達狀況及反義miR-196a對人胰腺癌PANC-1細胞生物學行為的影響.方法:miR-196a採用實時熒光定量PCR檢測.人工化學閤成反義miR-196a併轉染 PANC-1細胞.CCK-8法檢測細胞增殖.流式細胞術檢測細胞凋亡情況.通過劃痕損傷實驗和Transwell小室細胞侵襲、遷移實驗檢測PANC-1細胞侵襲和遷移能力.構建野生型及突變型覈因子κB抑製蛋白α(NFKBIA)3′ UTR的螢光素酶報告載體,檢測海腎螢光素酶的相對活性以驗證miR-196a對NFKBIA mRNA的作用靶點.結果:人胰腺癌細胞繫中miR-196a呈高錶達;轉染反義miR-196a後,PANC-1細胞miR-196a錶達下降,其細胞增殖和凋亡無顯著改變(P>0.05);而轉染反義miR-196a組中通過Transwell小室的細胞數明顯低于各對照組 (P<0.01).與各對照組相比,共轉染野生型NFKBIA的3′ UTR和反義miR-196a可使海腎螢光素酶相對活性顯著提高.結論:miR-196a可能是癌微RNA(oncomiR)之一,有望成為人胰腺癌基因治療的候選靶點.
목적:탐토미소RNA-196a(miR-196a)재이선암세포계중표체상황급반의miR-196a대인이선암PANC-1세포생물학행위적영향.방법:miR-196a채용실시형광정량PCR검측.인공화학합성반의miR-196a병전염 PANC-1세포.CCK-8법검측세포증식.류식세포술검측세포조망정황.통과화흔손상실험화Transwell소실세포침습、천이실험검측PANC-1세포침습화천이능력.구건야생형급돌변형핵인자κB억제단백α(NFKBIA)3′ UTR적형광소매보고재체,검측해신형광소매적상대활성이험증miR-196a대NFKBIA mRNA적작용파점.결과:인이선암세포계중miR-196a정고표체;전염반의miR-196a후,PANC-1세포miR-196a표체하강,기세포증식화조망무현저개변(P>0.05);이전염반의miR-196a조중통과Transwell소실적세포수명현저우각대조조 (P<0.01).여각대조조상비,공전염야생형NFKBIA적3′ UTR화반의miR-196a가사해신형광소매상대활성현저제고.결론:miR-196a가능시암미RNA(oncomiR)지일,유망성위인이선암기인치료적후선파점.
