安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
25期
12351-12353
,共3页
山杏%PCR%ISSR%正交设计
山杏%PCR%ISSR%正交設計
산행%PCR%ISSR%정교설계
[目的]构建陕北山杏ISSR-PCR反应体系.[方法]以陕北山杏为试材,采用CTAB法提取其幼叶基因组DNA,利用正交设计L9(34)对山杏ISSR-PCR反应体系的4个因素(Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶)在3个水平上进行试验,最后应用SPSS统计软件对PCR结果进行分析.[结果]试验表明,各因素的不同水平对PCR反应体系结果都有显著影响,其中Taq DNA聚合酶用量影响最显著；建立了适合陕北山杏ISSR-PCR的最佳反应体系(20μl):Taq DNA聚合酶1.0U、MgCl2 1.0 mmol/L、dNTPs 0.15 mmol/L、引物0.30μ mol/L；对最佳反应体系进行验证,结果显示该体系稳定性好,操作性强.[结论]该研究为陕北山杏遗传多样性分析及种质资源研究等奠定了基础.
[目的]構建陝北山杏ISSR-PCR反應體繫.[方法]以陝北山杏為試材,採用CTAB法提取其幼葉基因組DNA,利用正交設計L9(34)對山杏ISSR-PCR反應體繫的4箇因素(Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚閤酶)在3箇水平上進行試驗,最後應用SPSS統計軟件對PCR結果進行分析.[結果]試驗錶明,各因素的不同水平對PCR反應體繫結果都有顯著影響,其中Taq DNA聚閤酶用量影響最顯著；建立瞭適閤陝北山杏ISSR-PCR的最佳反應體繫(20μl):Taq DNA聚閤酶1.0U、MgCl2 1.0 mmol/L、dNTPs 0.15 mmol/L、引物0.30μ mol/L；對最佳反應體繫進行驗證,結果顯示該體繫穩定性好,操作性彊.[結論]該研究為陝北山杏遺傳多樣性分析及種質資源研究等奠定瞭基礎.
[목적]구건협북산행ISSR-PCR반응체계.[방법]이협북산행위시재,채용CTAB법제취기유협기인조DNA,이용정교설계L9(34)대산행ISSR-PCR반응체계적4개인소(Mg2+、dNTPs、인물、Taq DNA취합매)재3개수평상진행시험,최후응용SPSS통계연건대PCR결과진행분석.[결과]시험표명,각인소적불동수평대PCR반응체계결과도유현저영향,기중Taq DNA취합매용량영향최현저；건립료괄합협북산행ISSR-PCR적최가반응체계(20μl):Taq DNA취합매1.0U、MgCl2 1.0 mmol/L、dNTPs 0.15 mmol/L、인물0.30μ mol/L；대최가반응체계진행험증,결과현시해체계은정성호,조작성강.[결론]해연구위협북산행유전다양성분석급충질자원연구등전정료기출.
