中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
9期
38-42
,共5页
闫若潜%安春霞%刘淑敏%赵雪丽%郭小玲%赵明军%吴志明
閆若潛%安春霞%劉淑敏%趙雪麗%郭小玲%趙明軍%吳誌明
염약잠%안춘하%류숙민%조설려%곽소령%조명군%오지명
猪传染性胃肠炎病毒%猪流行性腹泻病毒%二重RT-PCR%检测%建立%应用
豬傳染性胃腸炎病毒%豬流行性腹瀉病毒%二重RT-PCR%檢測%建立%應用
저전염성위장염병독%저류행성복사병독%이중RT-PCR%검측%건립%응용
为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与流行性腹泻病毒(PEDV)的快速鉴别诊断方法,本研究根据GenBank已登录的TGEV核蛋白(N)基因和PEDV膜蛋白(M)基因保守区域序列分别设计了1对特异性引物,以TGEV和PEDV混合总RNA为反转录模板,建立了TGEV和PEDV的二重RT-PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验；利用所建立的检测方法对临床疑似样品进行了应用检测,并对检测到的阳性样品进行克隆测序.结果表明,成功建立了TGEV和PEDV二重RT-PCR检测方法,该方法的检测灵敏度最低极限为10 TCID50/mL病毒含量,重复性好,特异性强,可特异性地扩增TGEV和PEDV细胞培养物,但对ST细胞和其他7种病原对照扩增不出任何条带；对22份临床疑似TGEV和PEDV感染样品检测结果与测序结果完全一致.本研究成功建立了TGEV与PEDV二重RT-PCR检测方法,可适用于猪传染性胃肠炎和流行性腹泻病的快速鉴别诊断.
為建立豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)與流行性腹瀉病毒(PEDV)的快速鑒彆診斷方法,本研究根據GenBank已登錄的TGEV覈蛋白(N)基因和PEDV膜蛋白(M)基因保守區域序列分彆設計瞭1對特異性引物,以TGEV和PEDV混閤總RNA為反轉錄模闆,建立瞭TGEV和PEDV的二重RT-PCR檢測方法,併進行瞭特異性、敏感性和重複性試驗；利用所建立的檢測方法對臨床疑似樣品進行瞭應用檢測,併對檢測到的暘性樣品進行剋隆測序.結果錶明,成功建立瞭TGEV和PEDV二重RT-PCR檢測方法,該方法的檢測靈敏度最低極限為10 TCID50/mL病毒含量,重複性好,特異性彊,可特異性地擴增TGEV和PEDV細胞培養物,但對ST細胞和其他7種病原對照擴增不齣任何條帶；對22份臨床疑似TGEV和PEDV感染樣品檢測結果與測序結果完全一緻.本研究成功建立瞭TGEV與PEDV二重RT-PCR檢測方法,可適用于豬傳染性胃腸炎和流行性腹瀉病的快速鑒彆診斷.
위건립저전염성위장염병독(TGEV)여류행성복사병독(PEDV)적쾌속감별진단방법,본연구근거GenBank이등록적TGEV핵단백(N)기인화PEDV막단백(M)기인보수구역서렬분별설계료1대특이성인물,이TGEV화PEDV혼합총RNA위반전록모판,건립료TGEV화PEDV적이중RT-PCR검측방법,병진행료특이성、민감성화중복성시험；이용소건립적검측방법대림상의사양품진행료응용검측,병대검측도적양성양품진행극륭측서.결과표명,성공건립료TGEV화PEDV이중RT-PCR검측방법,해방법적검측령민도최저겁한위10 TCID50/mL병독함량,중복성호,특이성강,가특이성지확증TGEV화PEDV세포배양물,단대ST세포화기타7충병원대조확증불출임하조대；대22빈림상의사TGEV화PEDV감염양품검측결과여측서결과완전일치.본연구성공건립료TGEV여PEDV이중RT-PCR검측방법,가괄용우저전염성위장염화류행성복사병적쾌속감별진단.
