滨州医学院学报
濱州醫學院學報
빈주의학원학보
JOURNAL OF BINZHOU MEDICAL COLLEGE
2003年
5期
326-328
,共3页
孙贻华%刁汇玲%赵春莉%李笑岩%王桂兰
孫貽華%刁彙玲%趙春莉%李笑巖%王桂蘭
손이화%조회령%조춘리%리소암%왕계란
顶体膜蛋白%包被抗原%抗精子抗体%人精子受精相关抗原%人卵透明带%蛋白电泳
頂體膜蛋白%包被抗原%抗精子抗體%人精子受精相關抗原%人卵透明帶%蛋白電泳
정체막단백%포피항원%항정자항체%인정자수정상관항원%인란투명대%단백전영
目的:研究提取和纯化与人卵透明带(HZP)作用更为密切的人精子膜蛋白,为改进精子包被抗原的制备方法和筛选避孕疫苗抗原提供科学依据.方法:①悬浮离心法制备人精子膜蛋白混合溶液;②卵子热溶透析法制备HZP溶液;③将人精子膜蛋白混合溶液进行SDS-PAGE电泳,然后全胶电洗脱分别收集蛋白溶液30管;④梅花孔葡聚糖凝胶试验及精卵结合体外实验鉴定出阳性管;⑤以阳性管内的HZP特异精子膜蛋白溶液包被抗原进行抗精子抗体(AsAb)检测.结果:SDS-PAGE电泳、梅花孔葡聚糖凝胶试验及精卵结合体外实验证实,与HZP结合的人精子膜蛋白有多种成分;全胶电洗脱后以第14管内成分之特异性最强,与标准蛋白分子量对照,其分子量范围为48~53 kD.结论:以电洗脱转移法纯化、筛选的人精子膜蛋白是特异的,与HZP具极强相关性;以该精子膜蛋白包被抗原用于检测AsAb,其灵敏度更高,交叉反应会明显减少.
目的:研究提取和純化與人卵透明帶(HZP)作用更為密切的人精子膜蛋白,為改進精子包被抗原的製備方法和篩選避孕疫苗抗原提供科學依據.方法:①懸浮離心法製備人精子膜蛋白混閤溶液;②卵子熱溶透析法製備HZP溶液;③將人精子膜蛋白混閤溶液進行SDS-PAGE電泳,然後全膠電洗脫分彆收集蛋白溶液30管;④梅花孔葡聚糖凝膠試驗及精卵結閤體外實驗鑒定齣暘性管;⑤以暘性管內的HZP特異精子膜蛋白溶液包被抗原進行抗精子抗體(AsAb)檢測.結果:SDS-PAGE電泳、梅花孔葡聚糖凝膠試驗及精卵結閤體外實驗證實,與HZP結閤的人精子膜蛋白有多種成分;全膠電洗脫後以第14管內成分之特異性最彊,與標準蛋白分子量對照,其分子量範圍為48~53 kD.結論:以電洗脫轉移法純化、篩選的人精子膜蛋白是特異的,與HZP具極彊相關性;以該精子膜蛋白包被抗原用于檢測AsAb,其靈敏度更高,交扠反應會明顯減少.
목적:연구제취화순화여인란투명대(HZP)작용경위밀절적인정자막단백,위개진정자포피항원적제비방법화사선피잉역묘항원제공과학의거.방법:①현부리심법제비인정자막단백혼합용액;②란자열용투석법제비HZP용액;③장인정자막단백혼합용액진행SDS-PAGE전영,연후전효전세탈분별수집단백용액30관;④매화공포취당응효시험급정란결합체외실험감정출양성관;⑤이양성관내적HZP특이정자막단백용액포피항원진행항정자항체(AsAb)검측.결과:SDS-PAGE전영、매화공포취당응효시험급정란결합체외실험증실,여HZP결합적인정자막단백유다충성분;전효전세탈후이제14관내성분지특이성최강,여표준단백분자량대조,기분자량범위위48~53 kD.결론:이전세탈전이법순화、사선적인정자막단백시특이적,여HZP구겁강상관성;이해정자막단백포피항원용우검측AsAb,기령민도경고,교차반응회명현감소.