CAJ | 학술논문

目的:研究外环境对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)定向分化成心肌样细胞的影响.方法:取SD大鼠骨髓,通过贴壁法进行MSCs培养,经过多次传代后获得较纯的MSCs.用5-氮胞苷进行诱导分化,显微镜下观察其形态变化,通过RT-PCR鉴定心肌特异基因心房利尿肽和脑钠肽表达.实验分Ⅰ组为在玻片上的5-氮胞苷干预的MSCs移入到心肌细胞培养环境中;Ⅱ组为5-氮胞苷干预的MSCs;Ⅲ组为玻片上未用5-氮胞苷干预的MSCs移入到心肌细胞培养环境中;Ⅳ组为未用5-氮胞苷干预的MSCs.显微镜下观察4组形态变化,并通过免疫组化鉴别结蛋白和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinI,cTnI)表达及其出现时间的早晚.结果:RT-PCR显示诱导6周后有心房利钠肽,脑钠肽的表达.Ⅱ组MSCs诱导后10 d可见细胞由原来扁平多角形变成长梭状,15 d后部分细胞胞体明显增粗,可见到有些细胞间有融合样情况发生,20 d左右类似肌管样细胞出现;而Ⅰ组在17d左右可以看到类似肌管样细胞;Ⅲ,Ⅳ组未见上述形态改变.免疫组化表明Ⅲ,Ⅳ组未见阳性细胞出现;Ⅰ,Ⅱ组可见阳性结果,且Ⅰ组阳性结果出现的比Ⅱ组更早.结论:MSCs在体外的化学诱导物条件下可以诱导分化成心肌样细胞,心肌细胞培养环境对其定向分化成心肌样细胞有促进作用.
목적:연구외배경대골수간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)정향분화성심기양세포적영향.방법:취SD대서골수,통과첩벽법진행MSCs배양,경과다차전대후획득교순적MSCs.용5-담포감진행유도분화,현미경하관찰기형태변화,통과RT-PCR감정심기특이기인심방이뇨태화뇌납태표체.실험분Ⅰ조위재파편상적5-담포감간예적MSCs이입도심기세포배양배경중;Ⅱ조위5-담포감간예적MSCs;Ⅲ조위파편상미용5-담포감간예적MSCs이입도심기세포배양배경중;Ⅳ조위미용5-담포감간예적MSCs.현미경하관찰4조형태변화,병통과면역조화감별결단백화심기기개단백Ⅰ(cardiac troponinI,cTnI)표체급기출현시간적조만.결과:RT-PCR현시유도6주후유심방리납태,뇌납태적표체.Ⅱ조MSCs유도후10 d가견세포유원래편평다각형변성장사상,15 d후부분세포포체명현증조,가견도유사세포간유융합양정황발생,20 d좌우유사기관양세포출현;이Ⅰ조재17d좌우가이간도유사기관양세포;Ⅲ,Ⅳ조미견상술형태개변.면역조화표명Ⅲ,Ⅳ조미견양성세포출현;Ⅰ,Ⅱ조가견양성결과,차Ⅰ조양성결과출현적비Ⅱ조경조.결론:MSCs재체외적화학유도물조건하가이유도분화성심기양세포,심기세포배양배경대기정향분화성심기양세포유촉진작용.