CAJ | 학술논문

目的:探讨不同急性髓细胞白血病细胞(AML)FAM样酪氨酸激酶3(FLT3)表达状况,筛选FLT3过表达细胞,并检测其编码FLT3近膜(JM)区的基因是否存在短状串联重复(ITD)突变.方法:选择THP-1、K562、HL-60、Dami、Meg-01细胞,以含内参GAPDH对照的半定量RT-PCR检测其FLT3 mRNA的表达,以流式细胞仪检测细胞膜表面FLT3蛋白的表达;提基因组DNA,PCR扩增其JM区,对有FLT3过表达的细胞,PCR扩增产物连T-载体后测序.结果:5种AML细胞中仅有THP-1、HL-60存在FLT3基因的表达,其mRNA表达相对于GAPDH的含量分别是0.83±0.07、0.48±0.05,2者比较差异有统计学意义(t=7.047,P＜0.01);细胞膜表面FLT3蛋白表达率分别是(43.55±4.44)%、(27.57±3.42)%,2者比较差异有统计学意义(t=8.029,P＜0.001).2种细胞经FLT3-JM区PCR产物测序均不存在ITD突变.结论:THP-1、HL-60是FLT3野生型过表达的AML细胞株.
목적:탐토불동급성수세포백혈병세포(AML)FAM양락안산격매3(FLT3)표체상황,사선FLT3과표체세포,병검측기편마FLT3근막(JM)구적기인시부존재단상천련중복(ITD)돌변.방법:선택THP-1、K562、HL-60、Dami、Meg-01세포,이함내삼GAPDH대조적반정량RT-PCR검측기FLT3 mRNA적표체,이류식세포의검측세포막표면FLT3단백적표체;제기인조DNA,PCR확증기JM구,대유FLT3과표체적세포,PCR확증산물련T-재체후측서.결과:5충AML세포중부유THP-1、HL-60존재FLT3기인적표체,기mRNA표체상대우GAPDH적함량분별시0.83±0.07、0.48±0.05,2자비교차이유통계학의의(t=7.047,P＜0.01);세포막표면FLT3단백표체솔분별시(43.55±4.44)%、(27.57±3.42)%,2자비교차이유통계학의의(t=8.029,P＜0.001).2충세포경FLT3-JM구PCR산물측서균불존재ITD돌변.결론:THP-1、HL-60시FLT3야생형과표체적AML세포주.