CAJ | 학술논문

目的:研究内源性一氧化氮合酶抑制物非对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)活化的影响及其机制.方法:原代分离和培养SD大鼠HSC细胞,加入不同浓度的ADMA(1,3或10 μmol/L)孵育12至48 h.细胞组织化学检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;酶联免疫吸附试验测定Ⅰ型胶原的合成;逆转录PCR检测HSC转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA水平;荧光发光法检测细胞内氧自由基(reactive oxidant species,ROS)生成;凝胶电泳迁移率试验检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活性.结果:ADMA能呈浓度和时间依赖性上调HSC TGF-β1 mRNA水平,增加α-SMA阳性细胞数和促进Ⅰ型胶原的合成.同时,ADMA能显著增加细胞内ROS生成和诱导NF-κB活化,而预处理抗氧化剂四氧化吡咯二硫代氨基甲酸酯能抑制ADMA(10 μmol/L)诱导的NF-κB活化和TGF-β1 mRNA水平上调.结论:ADMA能诱导HSC的激活(包括收缩和分泌功能),其作用与激活细胞内ROS-NF-κB途径,上调TGF-β1表达有关.因此,ADMA可能是一种新的HSC功能调节因子,在肝纤维化的发生发展中起重要作用.
목적:연구내원성일양화담합매억제물비대칭이갑기정안산(asymmetric dimethylarginine,ADMA)대간성상세포(hepatic stellate cells,HSC)활화적영향급기궤제.방법:원대분리화배양SD대서HSC세포,가입불동농도적ADMA(1,3혹10 μmol/L)부육12지48 h.세포조직화학검측α-평활기기동단백(α-smooth muscle actin,α-SMA)표체;매련면역흡부시험측정Ⅰ형효원적합성;역전록PCR검측HSC전화생장인자-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA수평;형광발광법검측세포내양자유기(reactive oxidant species,ROS)생성;응효전영천이솔시험검측핵인자-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)활성.결과:ADMA능정농도화시간의뢰성상조HSC TGF-β1 mRNA수평,증가α-SMA양성세포수화촉진Ⅰ형효원적합성.동시,ADMA능현저증가세포내ROS생성화유도NF-κB활화,이예처리항양화제사양화필각이류대안기갑산지능억제ADMA(10 μmol/L)유도적NF-κB활화화TGF-β1 mRNA수평상조.결론:ADMA능유도HSC적격활(포괄수축화분비공능),기작용여격활세포내ROS-NF-κB도경,상조TGF-β1표체유관.인차,ADMA가능시일충신적HSC공능조절인자,재간섬유화적발생발전중기중요작용.