中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2007年
12期
1176-1179
,共4页
王新帅%丘立文%潘玉先%狄飙%车小燕
王新帥%丘立文%潘玉先%狄飆%車小燕
왕신수%구립문%반옥선%적표%차소연
登革病毒%非结构蛋白NS1%单克隆抗体
登革病毒%非結構蛋白NS1%單剋隆抗體
등혁병독%비결구단백NS1%단극륭항체
目的 制备并鉴定Ⅱ型登革病毒非结构蛋白NS1(DV2-NS1)的血清型特异性单克隆抗体.方法 以具有良好抗原性的重组DV2-NS1蛋白与灭活的Ⅱ型登革病毒(DV2)混合免疫Ba1b/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞经间接ELISA法、IFA法筛选,ELISA、IFA及Western Blot对mAbs的类型及亚类、交叉实验及特异性等进行鉴定.结果 免疫的Ba1b/c小鼠经多次融合筛选,共获得14株血清型特异性抗DV2-NS1蛋白的mAbs,其亚类测定两株为IgG2b,余均为IgG1.ELISA和免疫印迹显示这些mAbs与重组DV2-NS1蛋白和DV2抗原均特异性结合,IFA结果显示这14株单抗特异结合Ⅱ型登革病毒,与其它3型登革病毒无交叉.结论 成功获得了特异性针对DV2-NS1蛋白的mAb,为进一步研究NS1蛋白的结构和功能以及研制早期诊断试剂奠定基础.
目的 製備併鑒定Ⅱ型登革病毒非結構蛋白NS1(DV2-NS1)的血清型特異性單剋隆抗體.方法 以具有良好抗原性的重組DV2-NS1蛋白與滅活的Ⅱ型登革病毒(DV2)混閤免疫Ba1b/c小鼠,取其脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞融閤,雜交瘤細胞經間接ELISA法、IFA法篩選,ELISA、IFA及Western Blot對mAbs的類型及亞類、交扠實驗及特異性等進行鑒定.結果 免疫的Ba1b/c小鼠經多次融閤篩選,共穫得14株血清型特異性抗DV2-NS1蛋白的mAbs,其亞類測定兩株為IgG2b,餘均為IgG1.ELISA和免疫印跡顯示這些mAbs與重組DV2-NS1蛋白和DV2抗原均特異性結閤,IFA結果顯示這14株單抗特異結閤Ⅱ型登革病毒,與其它3型登革病毒無交扠.結論 成功穫得瞭特異性針對DV2-NS1蛋白的mAb,為進一步研究NS1蛋白的結構和功能以及研製早期診斷試劑奠定基礎.
목적 제비병감정Ⅱ형등혁병독비결구단백NS1(DV2-NS1)적혈청형특이성단극륭항체.방법 이구유량호항원성적중조DV2-NS1단백여멸활적Ⅱ형등혁병독(DV2)혼합면역Ba1b/c소서,취기비세포여소서골수류세포융합,잡교류세포경간접ELISA법、IFA법사선,ELISA、IFA급Western Blot대mAbs적류형급아류、교차실험급특이성등진행감정.결과 면역적Ba1b/c소서경다차융합사선,공획득14주혈청형특이성항DV2-NS1단백적mAbs,기아류측정량주위IgG2b,여균위IgG1.ELISA화면역인적현시저사mAbs여중조DV2-NS1단백화DV2항원균특이성결합,IFA결과현시저14주단항특이결합Ⅱ형등혁병독,여기타3형등혁병독무교차.결론 성공획득료특이성침대DV2-NS1단백적mAb,위진일보연구NS1단백적결구화공능이급연제조기진단시제전정기출.
