长治医学院学报
長治醫學院學報
장치의학원학보
JOURNAL OF CHANGZHI MEDICAL COLLEGE
2008年
1期
6-8
,共3页
申徐良%陈方平%魏武%张梅香%史文芝%秦小琪%徐洪亮
申徐良%陳方平%魏武%張梅香%史文芝%秦小琪%徐洪亮
신서량%진방평%위무%장매향%사문지%진소기%서홍량
等位基因特异性-PCR%JAK2V617F突变%限制性内切酶BsaXⅠ
等位基因特異性-PCR%JAK2V617F突變%限製性內切酶BsaXⅠ
등위기인특이성-PCR%JAK2V617F돌변%한제성내절매BsaXⅠ
目的:建立敏感特异的JAK2V617F点突变的临床检测方法.方法:基因组DNA从HEL细胞或正常志愿者外周血中提取.采用等位基因特异性-PCR(Allele specific-PCR,AS-PCR)和限制性内切酶消化的方法检测基因组中JAK2V617F突变.结果:本AS-PCR法可对JAK2基因扩增出364 bp的内参照条带,当存在JAK2V617F突变时,又可以扩增出203 bp的突变条带.只有野生型内参照条带364 bp可被BsaXⅠ消化切割.结论:AS-PCR法和限制性内切酶法是检测JAK2V617F突变的敏感特异的检测方法,可以成功应用于临床检测.
目的:建立敏感特異的JAK2V617F點突變的臨床檢測方法.方法:基因組DNA從HEL細胞或正常誌願者外週血中提取.採用等位基因特異性-PCR(Allele specific-PCR,AS-PCR)和限製性內切酶消化的方法檢測基因組中JAK2V617F突變.結果:本AS-PCR法可對JAK2基因擴增齣364 bp的內參照條帶,噹存在JAK2V617F突變時,又可以擴增齣203 bp的突變條帶.隻有野生型內參照條帶364 bp可被BsaXⅠ消化切割.結論:AS-PCR法和限製性內切酶法是檢測JAK2V617F突變的敏感特異的檢測方法,可以成功應用于臨床檢測.
목적:건립민감특이적JAK2V617F점돌변적림상검측방법.방법:기인조DNA종HEL세포혹정상지원자외주혈중제취.채용등위기인특이성-PCR(Allele specific-PCR,AS-PCR)화한제성내절매소화적방법검측기인조중JAK2V617F돌변.결과:본AS-PCR법가대JAK2기인확증출364 bp적내삼조조대,당존재JAK2V617F돌변시,우가이확증출203 bp적돌변조대.지유야생형내삼조조대364 bp가피BsaXⅠ소화절할.결론:AS-PCR법화한제성내절매법시검측JAK2V617F돌변적민감특이적검측방법,가이성공응용우림상검측.
