CAJ | 학술논문

目的:将经成骨诱导的兔骨髓来源的间充质干细胞与猪小肠黏膜下层复合,构建的组织工程骨膜,与天然骨膜在形态结构和功能上非常类似.实验着重观察不同预湿方法对构建的组织工程骨膜细胞黏附率的影响,为有效构建组织工程化骨膜奠定理论基础.方法:实验于2005-09/2007-03在兰州大学附属第二医院骨科研究所完成.①实验材料:20 d的新西兰纯种兔2只.②实验过程及分组:取健康新西兰幼兔骨髓,密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞并进行体外扩增、诱导分化,然后与经过胎牛血清(实验组)、磷酸盐缓冲液(对照组)预湿处理的猪小肠黏膜下层复合构建组织工程骨膜,体外培养2周.③实验评估:计算贴附率、测定碱性磷酸酶活性,并用倒置显微镜、扫描电镜观察生长、分裂、增殖情况.结果:①细胞贴附率:接种后5h实验组细胞贴附率高于对照组[(57.34±2.23)%,(39.16±5.22)%,P＜0.01];12 h实验组细胞贴附率高于对照组[(72.45±1.15)%,(54.47±3.46)%,P＜0.01].②倒置显微镜观察:实验组比对照组更易黏附、伸展.③扫描电镜观察:复合培养第3天,实验组可见材料表面的细胞已完全伸展,附着在材料表面;对照组细胞大多呈不规则形,未完全伸展.培养7 d以后两组细胞差异不大.④碱性磷酸酶活性测定:复合培养第5,10,14天,实验组的碱性磷酸酶活性均明显高于对照组,差异有非常显著性(P＜0.01).结论:用胎牛血清预湿小肠黏膜下层,有利于提高接种效率,从而能更有效的构建组织工程骨膜.
목적:장경성골유도적토골수래원적간충질간세포여저소장점막하층복합,구건적조직공정골막,여천연골막재형태결구화공능상비상유사.실험착중관찰불동예습방법대구건적조직공정골막세포점부솔적영향,위유효구건조직공정화골막전정이론기출.방법:실험우2005-09/2007-03재란주대학부속제이의원골과연구소완성.①실험재료:20 d적신서란순충토2지.②실험과정급분조:취건강신서란유토골수,밀도제도리심법분리골수간충질간세포병진행체외확증、유도분화,연후여경과태우혈청(실험조)、린산염완충액(대조조)예습처리적저소장점막하층복합구건조직공정골막,체외배양2주.③실험평고:계산첩부솔、측정감성린산매활성,병용도치현미경、소묘전경관찰생장、분렬、증식정황.결과:①세포첩부솔:접충후5h실험조세포첩부솔고우대조조[(57.34±2.23)%,(39.16±5.22)%,P＜0.01];12 h실험조세포첩부솔고우대조조[(72.45±1.15)%,(54.47±3.46)%,P＜0.01].②도치현미경관찰:실험조비대조조경역점부、신전.③소묘전경관찰:복합배양제3천,실험조가견재료표면적세포이완전신전,부착재재료표면;대조조세포대다정불규칙형,미완전신전.배양7 d이후량조세포차이불대.④감성린산매활성측정:복합배양제5,10,14천,실험조적감성린산매활성균명현고우대조조,차이유비상현저성(P＜0.01).결론:용태우혈청예습소장점막하층,유리우제고접충효솔,종이능경유효적구건조직공정골막.