广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
4期
497-499
,共3页
杨启化%陈斌鸣%陈素钻%郭安娜%李秋元%俞晶%刘璇芝%荆绪斌%郭光华
楊啟化%陳斌鳴%陳素鑽%郭安娜%李鞦元%俞晶%劉璇芝%荊緒斌%郭光華
양계화%진빈명%진소찬%곽안나%리추원%유정%류선지%형서빈%곽광화
RNAi%食管癌%FRα%细胞增殖%凋亡
RNAi%食管癌%FRα%細胞增殖%凋亡
RNAi%식관암%FRα%세포증식%조망
目的 利用RNAi技术特异性抑制食管癌EC109细胞株叶酸受体α(folate receptor α,FRα)mRNA 表达,研究其对EC109细胞株体外增殖能力的影响.方法 化学合成针对FRα基因3个不同靶点的3条FRαsiRNA(FRαsiRNA1,FRαsiRNA2和FRαsiRNA3),分别转染EC109细胞株,以未转染细胞为正常对照,转染阴性siRNA的细胞为阴性对照.免疫印迹法检测FRα蛋白表达,CCK8法检测RNA干扰后24,48,72,96 h细胞增殖,流式细胞仪检测RNA干扰后24,48,72,96 h细胞凋亡.结果 免疫印迹法提示FRαsiRNA1组FRα表达为正常对照组的14.7%;FRαsiRNA2组FRα表达为正常对照组的55.1%;FRαsiRNA3组FRα表达为正常对照组的62.9%;干扰后24,48,72,96 h细胞存活率均降低,分别为(81.15±1.97)%,(68.18±3.45)%,(49.82±7.64)%,(32.92±2.61)%.干扰后96 h细胞存活率最低,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.001);干扰后24,48,72,96h干扰组凋亡分别为(3.95±0.45)%,(6.23±1.11)%,(10.00±0.30)%,(3.07±0.40)%,干扰后72 h凋亡率最高,与正常对照组和阴性对照组比较差异有显著性(P<0.001).结论 化学转染法成功转染并抑制了FRα在食管癌细胞株EC109中的表达,干扰后细胞增殖受抑制,凋亡增加.
目的 利用RNAi技術特異性抑製食管癌EC109細胞株葉痠受體α(folate receptor α,FRα)mRNA 錶達,研究其對EC109細胞株體外增殖能力的影響.方法 化學閤成針對FRα基因3箇不同靶點的3條FRαsiRNA(FRαsiRNA1,FRαsiRNA2和FRαsiRNA3),分彆轉染EC109細胞株,以未轉染細胞為正常對照,轉染陰性siRNA的細胞為陰性對照.免疫印跡法檢測FRα蛋白錶達,CCK8法檢測RNA榦擾後24,48,72,96 h細胞增殖,流式細胞儀檢測RNA榦擾後24,48,72,96 h細胞凋亡.結果 免疫印跡法提示FRαsiRNA1組FRα錶達為正常對照組的14.7%;FRαsiRNA2組FRα錶達為正常對照組的55.1%;FRαsiRNA3組FRα錶達為正常對照組的62.9%;榦擾後24,48,72,96 h細胞存活率均降低,分彆為(81.15±1.97)%,(68.18±3.45)%,(49.82±7.64)%,(32.92±2.61)%.榦擾後96 h細胞存活率最低,與陰性對照組比較差異有顯著性(P<0.001);榦擾後24,48,72,96h榦擾組凋亡分彆為(3.95±0.45)%,(6.23±1.11)%,(10.00±0.30)%,(3.07±0.40)%,榦擾後72 h凋亡率最高,與正常對照組和陰性對照組比較差異有顯著性(P<0.001).結論 化學轉染法成功轉染併抑製瞭FRα在食管癌細胞株EC109中的錶達,榦擾後細胞增殖受抑製,凋亡增加.
목적 이용RNAi기술특이성억제식관암EC109세포주협산수체α(folate receptor α,FRα)mRNA 표체,연구기대EC109세포주체외증식능력적영향.방법 화학합성침대FRα기인3개불동파점적3조FRαsiRNA(FRαsiRNA1,FRαsiRNA2화FRαsiRNA3),분별전염EC109세포주,이미전염세포위정상대조,전염음성siRNA적세포위음성대조.면역인적법검측FRα단백표체,CCK8법검측RNA간우후24,48,72,96 h세포증식,류식세포의검측RNA간우후24,48,72,96 h세포조망.결과 면역인적법제시FRαsiRNA1조FRα표체위정상대조조적14.7%;FRαsiRNA2조FRα표체위정상대조조적55.1%;FRαsiRNA3조FRα표체위정상대조조적62.9%;간우후24,48,72,96 h세포존활솔균강저,분별위(81.15±1.97)%,(68.18±3.45)%,(49.82±7.64)%,(32.92±2.61)%.간우후96 h세포존활솔최저,여음성대조조비교차이유현저성(P<0.001);간우후24,48,72,96h간우조조망분별위(3.95±0.45)%,(6.23±1.11)%,(10.00±0.30)%,(3.07±0.40)%,간우후72 h조망솔최고,여정상대조조화음성대조조비교차이유현저성(P<0.001).결론 화학전염법성공전염병억제료FRα재식관암세포주EC109중적표체,간우후세포증식수억제,조망증가.
