山东农业大学学报（自然科学版）
山東農業大學學報（自然科學版）
산동농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHANDONG AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2009年
3期
317-324
,共8页
尹国华%刘楠%孙兆楠%宋云枝%朱常香%温孚江
尹國華%劉楠%孫兆楠%宋雲枝%硃常香%溫孚江
윤국화%류남%손조남%송운지%주상향%온부강
Red重组系统%重叠延伸PCR%RNaseIII 缺失菌株%dsRNA%病毒抗性
Red重組繫統%重疊延伸PCR%RNaseIII 缺失菌株%dsRNA%病毒抗性
Red중조계통%중첩연신PCR%RNaseIII 결실균주%dsRNA%병독항성
大肠杆菌的rnc基因编码产物为RNaseIII酶,RNaseIII酶能降解细菌中绝大多数dsRNA.利用来源于λ噬菌体的Red重组系统和重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR),敲除了大肠杆菌origami(DE3)菌株的rnc基因,获得了RNaseIII 缺失型菌株M-origami.利用电激法,将构建的TMV运动蛋白基因(movement protein gene,MP)的dsRNA表达载体LMP480导入M-origami菌株中,IPTG诱导表达的结果显示:构建的M-origami/LMP480原核表达系统能高效表达TMV运动蛋白基因的dsRNA.初步的抗病性鉴定显示,表达的dsRNA能够诱发烟草对TMV的抗性.
大腸桿菌的rnc基因編碼產物為RNaseIII酶,RNaseIII酶能降解細菌中絕大多數dsRNA.利用來源于λ噬菌體的Red重組繫統和重疊延伸PCR技術(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR),敲除瞭大腸桿菌origami(DE3)菌株的rnc基因,穫得瞭RNaseIII 缺失型菌株M-origami.利用電激法,將構建的TMV運動蛋白基因(movement protein gene,MP)的dsRNA錶達載體LMP480導入M-origami菌株中,IPTG誘導錶達的結果顯示:構建的M-origami/LMP480原覈錶達繫統能高效錶達TMV運動蛋白基因的dsRNA.初步的抗病性鑒定顯示,錶達的dsRNA能夠誘髮煙草對TMV的抗性.
대장간균적rnc기인편마산물위RNaseIII매,RNaseIII매능강해세균중절대다수dsRNA.이용래원우λ서균체적Red중조계통화중첩연신PCR기술(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR),고제료대장간균origami(DE3)균주적rnc기인,획득료RNaseIII 결실형균주M-origami.이용전격법,장구건적TMV운동단백기인(movement protein gene,MP)적dsRNA표체재체LMP480도입M-origami균주중,IPTG유도표체적결과현시:구건적M-origami/LMP480원핵표체계통능고효표체TMV운동단백기인적dsRNA.초보적항병성감정현시,표체적dsRNA능구유발연초대TMV적항성.
