中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2010年
5期
343-345
,共3页
王萍%侯续伟%尹波%任甫
王萍%侯續偉%尹波%任甫
왕평%후속위%윤파%임보
人端粒酶逆转录酶%表达载体%基因转染%永生化
人耑粒酶逆轉錄酶%錶達載體%基因轉染%永生化
인단립매역전록매%표체재체%기인전염%영생화
目的 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的基因表达载体,为人们建立永生化的细胞系提供材料,为临床细胞移植的实验研究和疾病治疗奠定实验基础.方法 根据hTERT全长cDNA序列设计引物进行PCR扩增,扩增用的模板是人胎脑cDNA文库,PCR扩增产物与pGEM-T载体连接后进行测序鉴定.结果 PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功.产物测序表明,hTERT基因片段与GenBank公布的相应基因同源性比较,核苷酸序列的同源性为98.87%,氨基酸序列的同源性为99.67%.结论 成功构建了hTERT真核表达质粒.
目的 構建人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)片段的基因錶達載體,為人們建立永生化的細胞繫提供材料,為臨床細胞移植的實驗研究和疾病治療奠定實驗基礎.方法 根據hTERT全長cDNA序列設計引物進行PCR擴增,擴增用的模闆是人胎腦cDNA文庫,PCR擴增產物與pGEM-T載體連接後進行測序鑒定.結果 PCR擴增及限製性酶切法證實重組真覈錶達質粒的構建成功.產物測序錶明,hTERT基因片段與GenBank公佈的相應基因同源性比較,覈苷痠序列的同源性為98.87%,氨基痠序列的同源性為99.67%.結論 成功構建瞭hTERT真覈錶達質粒.
목적 구건인단립매역전록매(hTERT)편단적기인표체재체,위인문건립영생화적세포계제공재료,위림상세포이식적실험연구화질병치료전정실험기출.방법 근거hTERT전장cDNA서렬설계인물진행PCR확증,확증용적모판시인태뇌cDNA문고,PCR확증산물여pGEM-T재체련접후진행측서감정.결과 PCR확증급한제성매절법증실중조진핵표체질립적구건성공.산물측서표명,hTERT기인편단여GenBank공포적상응기인동원성비교,핵감산서렬적동원성위98.87%,안기산서렬적동원성위99.67%.결론 성공구건료hTERT진핵표체질립.
