南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
7期
932-936
,共5页
王雪峰%何援利%付霞霏%彭冬先
王雪峰%何援利%付霞霏%彭鼕先
왕설봉%하원리%부하비%팽동선
Bcl-2基因%慢病毒%化疗药物%细胞凋亡%原代卵巢颗粒细胞
Bcl-2基因%慢病毒%化療藥物%細胞凋亡%原代卵巢顆粒細胞
Bcl-2기인%만병독%화료약물%세포조망%원대란소과립세포
目的 探讨携带Bcl-2基因的慢病毒对磷酰胺氮芥诱导体外培养的原代人卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用.方法 利用分子生物学技术,成功构建携带Bcl-2基因慢病毒载体,包装成高滴度慢病毒,将重组慢病毒体外感染人卵巢原代颗粒细胞,再加入浓度30 μmol/L的磷酰胺氮芥诱导细胞凋亡.分为4组进行实验:(a)实验组:pGC-FU-Bcl-2+酰胺氮芥(PM);(b)空载对照组:pGC-FU-EGFP+ PM;(c)实验对照组:只加PM;(d)空白对照组:不加PM及病毒.采用流式细胞仪、Hoechst 33258染色检测卵巢颗粒细胞凋亡情况;利用Western blot检测Bcl-2蛋白的表达情况.结果 空白对照组(GCs),凋亡峰不明显,颗粒细胞凋亡率为(1.93±0.28)%,实验组(GCs+PM+pGC-FU-Bcl-2)出现微弱的凋亡峰,颗粒细胞凋亡率为(6.99±0.55)%,比实验对照组(GCs+PM)及空载对照组(GCs+PM+pGC-FU-EGFP)显著低,但显著高于空白对照组(P<0.05).实验组Bcl-2蛋白的表达明显增高,显著高于其余各对照组(P<0.05).结论 携带Bcl-2基因的慢病毒感染靶细胞后可以过度分泌Bcl-2蛋白,显著抑制卵巢颗粒细胞的凋亡,保护PM对颗粒细胞的理化损伤.
目的 探討攜帶Bcl-2基因的慢病毒對燐酰胺氮芥誘導體外培養的原代人卵巢顆粒細胞凋亡的保護作用.方法 利用分子生物學技術,成功構建攜帶Bcl-2基因慢病毒載體,包裝成高滴度慢病毒,將重組慢病毒體外感染人卵巢原代顆粒細胞,再加入濃度30 μmol/L的燐酰胺氮芥誘導細胞凋亡.分為4組進行實驗:(a)實驗組:pGC-FU-Bcl-2+酰胺氮芥(PM);(b)空載對照組:pGC-FU-EGFP+ PM;(c)實驗對照組:隻加PM;(d)空白對照組:不加PM及病毒.採用流式細胞儀、Hoechst 33258染色檢測卵巢顆粒細胞凋亡情況;利用Western blot檢測Bcl-2蛋白的錶達情況.結果 空白對照組(GCs),凋亡峰不明顯,顆粒細胞凋亡率為(1.93±0.28)%,實驗組(GCs+PM+pGC-FU-Bcl-2)齣現微弱的凋亡峰,顆粒細胞凋亡率為(6.99±0.55)%,比實驗對照組(GCs+PM)及空載對照組(GCs+PM+pGC-FU-EGFP)顯著低,但顯著高于空白對照組(P<0.05).實驗組Bcl-2蛋白的錶達明顯增高,顯著高于其餘各對照組(P<0.05).結論 攜帶Bcl-2基因的慢病毒感染靶細胞後可以過度分泌Bcl-2蛋白,顯著抑製卵巢顆粒細胞的凋亡,保護PM對顆粒細胞的理化損傷.
목적 탐토휴대Bcl-2기인적만병독대린선알담개유도체외배양적원대인란소과립세포조망적보호작용.방법 이용분자생물학기술,성공구건휴대Bcl-2기인만병독재체,포장성고적도만병독,장중조만병독체외감염인란소원대과립세포,재가입농도30 μmol/L적린선알담개유도세포조망.분위4조진행실험:(a)실험조:pGC-FU-Bcl-2+선알담개(PM);(b)공재대조조:pGC-FU-EGFP+ PM;(c)실험대조조:지가PM;(d)공백대조조:불가PM급병독.채용류식세포의、Hoechst 33258염색검측란소과립세포조망정황;이용Western blot검측Bcl-2단백적표체정황.결과 공백대조조(GCs),조망봉불명현,과립세포조망솔위(1.93±0.28)%,실험조(GCs+PM+pGC-FU-Bcl-2)출현미약적조망봉,과립세포조망솔위(6.99±0.55)%,비실험대조조(GCs+PM)급공재대조조(GCs+PM+pGC-FU-EGFP)현저저,단현저고우공백대조조(P<0.05).실험조Bcl-2단백적표체명현증고,현저고우기여각대조조(P<0.05).결론 휴대Bcl-2기인적만병독감염파세포후가이과도분비Bcl-2단백,현저억제란소과립세포적조망,보호PM대과립세포적이화손상.