中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
6期
93-97
,共5页
崔茹鹏%沈文%鲁海富%孙延鸣
崔茹鵬%瀋文%魯海富%孫延鳴
최여붕%침문%로해부%손연명
巴什拜羊%ISG15基因%克隆%序列分析
巴什拜羊%ISG15基因%剋隆%序列分析
파십배양%ISG15기인%극륭%서렬분석
本研究旨在了解新疆巴氏拜羊类泛素蛋白ISG15基因的序列特征.采集巴什拜羊外周血液,从中分离得到淋巴细胞并提取RNA,设计特异性引物进行RT-PCR,克隆出巴什拜羊ISG15基因序列,回收PCR产物与pMD18-T载体连接后转化DH5α,检测阳性克隆、测序并进行序列分析.结果表明,克隆的巴什拜羊ISG 15基因编码区全长为522 bp,编码172个氨基酸.BLAST结果表明,巴什拜羊ISG15基因与绵羊、山羊、小尾寒羊、水牛、牛和野猪的ISG15基因序列同源性分别为99%、98%、95%、94%、94%和82%.构建基因进化树分析结果显示,巴什拜羊与绵羊先聚为一类,再与小尾寒羊聚为一类,然后和牛聚为一类.该聚类结果与生物学上的分类一致.
本研究旨在瞭解新疆巴氏拜羊類汎素蛋白ISG15基因的序列特徵.採集巴什拜羊外週血液,從中分離得到淋巴細胞併提取RNA,設計特異性引物進行RT-PCR,剋隆齣巴什拜羊ISG15基因序列,迴收PCR產物與pMD18-T載體連接後轉化DH5α,檢測暘性剋隆、測序併進行序列分析.結果錶明,剋隆的巴什拜羊ISG 15基因編碼區全長為522 bp,編碼172箇氨基痠.BLAST結果錶明,巴什拜羊ISG15基因與綿羊、山羊、小尾寒羊、水牛、牛和野豬的ISG15基因序列同源性分彆為99%、98%、95%、94%、94%和82%.構建基因進化樹分析結果顯示,巴什拜羊與綿羊先聚為一類,再與小尾寒羊聚為一類,然後和牛聚為一類.該聚類結果與生物學上的分類一緻.
본연구지재료해신강파씨배양류범소단백ISG15기인적서렬특정.채집파십배양외주혈액,종중분리득도림파세포병제취RNA,설계특이성인물진행RT-PCR,극륭출파십배양ISG15기인서렬,회수PCR산물여pMD18-T재체련접후전화DH5α,검측양성극륭、측서병진행서렬분석.결과표명,극륭적파십배양ISG 15기인편마구전장위522 bp,편마172개안기산.BLAST결과표명,파십배양ISG15기인여면양、산양、소미한양、수우、우화야저적ISG15기인서렬동원성분별위99%、98%、95%、94%、94%화82%.구건기인진화수분석결과현시,파십배양여면양선취위일류,재여소미한양취위일류,연후화우취위일류.해취류결과여생물학상적분류일치.