中国寄生虫病防治杂志
中國寄生蟲病防治雜誌
중국기생충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITIC DISEASE CONTROL
2005年
2期
111-113
,共3页
牛廷献%刘明远%卢强%付宝权%Pascal Boireau
牛廷獻%劉明遠%盧彊%付寶權%Pascal Boireau
우정헌%류명원%로강%부보권%Pascal Boireau
旋毛虫%新生幼虫期特异性基因(T668 cDNA)%原核表达%鉴定
鏇毛蟲%新生幼蟲期特異性基因(T668 cDNA)%原覈錶達%鑒定
선모충%신생유충기특이성기인(T668 cDNA)%원핵표체%감정
目的对旋毛虫新生幼虫期特异性T668 cDNA进行表达及鉴定,以获得基因工程抗原. 方法应用PCR技术,从pBK-CMV-T668重组质粒中扩增到不含信号肽序列的T668 cDNA片段,将目的基因克隆于原核表达载体pET28a(+),构建pETT668重组质粒,再将其转化到E. coli表达菌株DE3感受态细胞中,经IPTG诱导表达,以SDS-PAGE鉴定表达产物. 结果 pETT668表达蛋白的分子质量单位为49 ku,且随诱导时间的延长蛋白表达量逐渐增加,诱导5 h时表达量达到高峰;薄层扫描结果显示,目的蛋白占菌体总蛋白的34.6 %.Western-blotting 检测显示,表达蛋白可被感染旋毛虫家猪血清所识别. 结论旋毛虫新生幼虫期特异性T668基因在大肠埃希菌中获得高效表达,且表达蛋白具有良好的抗原性.
目的對鏇毛蟲新生幼蟲期特異性T668 cDNA進行錶達及鑒定,以穫得基因工程抗原. 方法應用PCR技術,從pBK-CMV-T668重組質粒中擴增到不含信號肽序列的T668 cDNA片段,將目的基因剋隆于原覈錶達載體pET28a(+),構建pETT668重組質粒,再將其轉化到E. coli錶達菌株DE3感受態細胞中,經IPTG誘導錶達,以SDS-PAGE鑒定錶達產物. 結果 pETT668錶達蛋白的分子質量單位為49 ku,且隨誘導時間的延長蛋白錶達量逐漸增加,誘導5 h時錶達量達到高峰;薄層掃描結果顯示,目的蛋白佔菌體總蛋白的34.6 %.Western-blotting 檢測顯示,錶達蛋白可被感染鏇毛蟲傢豬血清所識彆. 結論鏇毛蟲新生幼蟲期特異性T668基因在大腸埃希菌中穫得高效錶達,且錶達蛋白具有良好的抗原性.
목적대선모충신생유충기특이성T668 cDNA진행표체급감정,이획득기인공정항원. 방법응용PCR기술,종pBK-CMV-T668중조질립중확증도불함신호태서렬적T668 cDNA편단,장목적기인극륭우원핵표체재체pET28a(+),구건pETT668중조질립,재장기전화도E. coli표체균주DE3감수태세포중,경IPTG유도표체,이SDS-PAGE감정표체산물. 결과 pETT668표체단백적분자질량단위위49 ku,차수유도시간적연장단백표체량축점증가,유도5 h시표체량체도고봉;박층소묘결과현시,목적단백점균체총단백적34.6 %.Western-blotting 검측현시,표체단백가피감염선모충가저혈청소식별. 결론선모충신생유충기특이성T668기인재대장애희균중획득고효표체,차표체단백구유량호적항원성.
