生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2005年
12期
1192-1198
,共7页
p27kip1基因%再狭窄%纳米粒子%静脉移植
p27kip1基因%再狹窄%納米粒子%靜脈移植
p27kip1기인%재협착%납미입자%정맥이식
用美国FDA批准使用的生物可降解材料聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)为载体材料,制备载p27kip1基因的纳米粒子.用激光光散射法测定纳米粒子的平均粒径为288.9 nm,粒径呈窄分布,扫描电镜观察纳米粒子表面光滑.DNA含量为3%.包封效率为86%.观察p27kip1基因纳米粒子的体外释放情况,发现DNA体外最初释放速度较大,约1周后释放速度开始减缓,可维持平稳释放15天以上.体外转染大鼠血管平滑肌细胞,用流式细胞仪检测到p27kip1 基因纳米粒子对细胞周期进程的抑制作用.建立自体静脉移植大鼠模型,随机分成三组进行试验:p27kip1基因纳米粒子组,空白纳米粒子组,单纯静脉移植组.分别于给药后3天、7天、14天、28天取材,HE染色及Verhoeff染色检测内膜厚度,蛋白质印迹检测P27抑癌基因蛋白的表达,免疫组化SABC法检测移植静脉内膜PCNA、E2F表达.动物模型试验中转基因组内膜平均厚度较其他组明显减少(P＜0.01);转基因组PCNA的表达较其他组明显降低(P＜0.01);转基因组E2F的表达7～14天较其他组显著降低(P＜0.01);对照组及单纯静脉移植组之间均无明显差异.纳米粒子作为p27kip1基因载体能够有效抑制自体静脉移植后内膜平滑肌细胞的增殖.
用美國FDA批準使用的生物可降解材料聚乳痠聚乙醇痠共聚物(PLGA)為載體材料,製備載p27kip1基因的納米粒子.用激光光散射法測定納米粒子的平均粒徑為288.9 nm,粒徑呈窄分佈,掃描電鏡觀察納米粒子錶麵光滑.DNA含量為3%.包封效率為86%.觀察p27kip1基因納米粒子的體外釋放情況,髮現DNA體外最初釋放速度較大,約1週後釋放速度開始減緩,可維持平穩釋放15天以上.體外轉染大鼠血管平滑肌細胞,用流式細胞儀檢測到p27kip1 基因納米粒子對細胞週期進程的抑製作用.建立自體靜脈移植大鼠模型,隨機分成三組進行試驗:p27kip1基因納米粒子組,空白納米粒子組,單純靜脈移植組.分彆于給藥後3天、7天、14天、28天取材,HE染色及Verhoeff染色檢測內膜厚度,蛋白質印跡檢測P27抑癌基因蛋白的錶達,免疫組化SABC法檢測移植靜脈內膜PCNA、E2F錶達.動物模型試驗中轉基因組內膜平均厚度較其他組明顯減少(P＜0.01);轉基因組PCNA的錶達較其他組明顯降低(P＜0.01);轉基因組E2F的錶達7～14天較其他組顯著降低(P＜0.01);對照組及單純靜脈移植組之間均無明顯差異.納米粒子作為p27kip1基因載體能夠有效抑製自體靜脈移植後內膜平滑肌細胞的增殖.
용미국FDA비준사용적생물가강해재료취유산취을순산공취물(PLGA)위재체재료,제비재p27kip1기인적납미입자.용격광광산사법측정납미입자적평균립경위288.9 nm,립경정착분포,소묘전경관찰납미입자표면광활.DNA함량위3%.포봉효솔위86%.관찰p27kip1기인납미입자적체외석방정황,발현DNA체외최초석방속도교대,약1주후석방속도개시감완,가유지평은석방15천이상.체외전염대서혈관평활기세포,용류식세포의검측도p27kip1 기인납미입자대세포주기진정적억제작용.건립자체정맥이식대서모형,수궤분성삼조진행시험:p27kip1기인납미입자조,공백납미입자조,단순정맥이식조.분별우급약후3천、7천、14천、28천취재,HE염색급Verhoeff염색검측내막후도,단백질인적검측P27억암기인단백적표체,면역조화SABC법검측이식정맥내막PCNA、E2F표체.동물모형시험중전기인조내막평균후도교기타조명현감소(P＜0.01);전기인조PCNA적표체교기타조명현강저(P＜0.01);전기인조E2F적표체7～14천교기타조현저강저(P＜0.01);대조조급단순정맥이식조지간균무명현차이.납미입자작위p27kip1기인재체능구유효억제자체정맥이식후내막평활기세포적증식.
