第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
23期
2122-2124
,共3页
廖继佩%薛小平%尹文%雷迎峰%吕欣%杨敬%徐志凯
廖繼珮%薛小平%尹文%雷迎峰%呂訢%楊敬%徐誌凱
료계패%설소평%윤문%뢰영봉%려흔%양경%서지개
丙型肝炎病毒%非结构蛋白5A%干扰素敏感决定区%水泡性口炎病毒%空斑形成单位
丙型肝炎病毒%非結構蛋白5A%榦擾素敏感決定區%水泡性口炎病毒%空斑形成單位
병형간염병독%비결구단백5A%간우소민감결정구%수포성구염병독%공반형성단위
目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)NS5A的表达对水泡性口炎病毒(VSV)复制的影响.方法:将稳定转染的HeLa-NS5A和HeLa-NS5A-ΔISDR细胞在6孔培养板中培养24h后,加入人基因工程α2a型干扰素(rHuIFN-αt2a)至所需浓度.培养24h后加入VSV,继续培养相应时间.取培养上清液,按10-1稀释,50μL稀释液加入含Vero细胞的24孔培养板中.每孔加入含100 mL/L小牛血清的DMEM-7.5g/L羧甲基纤维素钠(CMC)1 mL.继续培养48 h后移走培养液,结晶紫染色,自来水轻柔洗净,记录噬斑形成单位(PFU).结果:干扰素(IFN)浓度为1×105 U/L,VSV对HeLa-NS5A细胞的致病变作用要比对HeLa-NS5A-ΔISDR细胞的致病作用更明显.在整个IFN浓度处理中,HeLa-NS5A细胞培养液中的病毒滴度是HeLa-NS5A-ΔISDR细胞培养液中的病毒滴度的2～5倍(P＜0.05).结论:NS5A能增强IFN敏感病毒的复制,HCVNS5A内的ISDR可能是造成IFN对HCV患者治疗效果的因素.
目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)NS5A的錶達對水泡性口炎病毒(VSV)複製的影響.方法:將穩定轉染的HeLa-NS5A和HeLa-NS5A-ΔISDR細胞在6孔培養闆中培養24h後,加入人基因工程α2a型榦擾素(rHuIFN-αt2a)至所需濃度.培養24h後加入VSV,繼續培養相應時間.取培養上清液,按10-1稀釋,50μL稀釋液加入含Vero細胞的24孔培養闆中.每孔加入含100 mL/L小牛血清的DMEM-7.5g/L羧甲基纖維素鈉(CMC)1 mL.繼續培養48 h後移走培養液,結晶紫染色,自來水輕柔洗淨,記錄噬斑形成單位(PFU).結果:榦擾素(IFN)濃度為1×105 U/L,VSV對HeLa-NS5A細胞的緻病變作用要比對HeLa-NS5A-ΔISDR細胞的緻病作用更明顯.在整箇IFN濃度處理中,HeLa-NS5A細胞培養液中的病毒滴度是HeLa-NS5A-ΔISDR細胞培養液中的病毒滴度的2～5倍(P＜0.05).結論:NS5A能增彊IFN敏感病毒的複製,HCVNS5A內的ISDR可能是造成IFN對HCV患者治療效果的因素.
목적:연구병형간염병독(HCV)NS5A적표체대수포성구염병독(VSV)복제적영향.방법:장은정전염적HeLa-NS5A화HeLa-NS5A-ΔISDR세포재6공배양판중배양24h후,가입인기인공정α2a형간우소(rHuIFN-αt2a)지소수농도.배양24h후가입VSV,계속배양상응시간.취배양상청액,안10-1희석,50μL희석액가입함Vero세포적24공배양판중.매공가입함100 mL/L소우혈청적DMEM-7.5g/L최갑기섬유소납(CMC)1 mL.계속배양48 h후이주배양액,결정자염색,자래수경유세정,기록서반형성단위(PFU).결과:간우소(IFN)농도위1×105 U/L,VSV대HeLa-NS5A세포적치병변작용요비대HeLa-NS5A-ΔISDR세포적치병작용경명현.재정개IFN농도처리중,HeLa-NS5A세포배양액중적병독적도시HeLa-NS5A-ΔISDR세포배양액중적병독적도적2～5배(P＜0.05).결론:NS5A능증강IFN민감병독적복제,HCVNS5A내적ISDR가능시조성IFN대HCV환자치료효과적인소.
