四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2006年
4期
515-519
,共5页
范敏%鲜均明%周光耀%梁传余%刘世喜
範敏%鮮均明%週光耀%樑傳餘%劉世喜
범민%선균명%주광요%량전여%류세희
p16β基因%细胞周期信号传导%喉癌%重组腺病毒
p16β基因%細胞週期信號傳導%喉癌%重組腺病毒
p16β기인%세포주기신호전도%후암%중조선병독
目的探讨野生型p16β对体外喉癌Hep-2细胞周期信号传导的干预作用.方法以重组腺病毒为载体,构建p16β的重组腺病毒AdEasy-GFP-p16β质粒,并在293细胞中包装、纯化.将已纯化的重组腺病毒AdEasy-GFP-p16β在体外转染Hep-2喉癌细胞,采用MTT实验、流式细胞术(FCM)、免疫组化、Western blot等实验手段检测Hep-2细胞的抑制/杀伤作用及其细胞周期信号、DNA含量、细胞凋亡率的变化;检测P16蛋白的表达和Hep-2细胞的超微结构变化.结果本研究成功地构建和制备了高滴度的AdEasy-GFP-p16β重组腺病毒,并高效地转移到Hep-2细胞内和表达P16蛋白,有效地抑制了Hep-2细胞的生长.被转染的Hep-2细胞被有效地阻滞在G0/G1期,提高了转染细胞的凋亡率.结论重组腺病毒AdEasy-GFP-p16β能高效感染Hep-2细胞,表达P16蛋白;有效抑制Hep-2细胞增殖;干预Hep-2细胞周期的信号传导机制和细胞周期,诱导凋亡,从而抑制肿瘤细胞增殖活性.
目的探討野生型p16β對體外喉癌Hep-2細胞週期信號傳導的榦預作用.方法以重組腺病毒為載體,構建p16β的重組腺病毒AdEasy-GFP-p16β質粒,併在293細胞中包裝、純化.將已純化的重組腺病毒AdEasy-GFP-p16β在體外轉染Hep-2喉癌細胞,採用MTT實驗、流式細胞術(FCM)、免疫組化、Western blot等實驗手段檢測Hep-2細胞的抑製/殺傷作用及其細胞週期信號、DNA含量、細胞凋亡率的變化;檢測P16蛋白的錶達和Hep-2細胞的超微結構變化.結果本研究成功地構建和製備瞭高滴度的AdEasy-GFP-p16β重組腺病毒,併高效地轉移到Hep-2細胞內和錶達P16蛋白,有效地抑製瞭Hep-2細胞的生長.被轉染的Hep-2細胞被有效地阻滯在G0/G1期,提高瞭轉染細胞的凋亡率.結論重組腺病毒AdEasy-GFP-p16β能高效感染Hep-2細胞,錶達P16蛋白;有效抑製Hep-2細胞增殖;榦預Hep-2細胞週期的信號傳導機製和細胞週期,誘導凋亡,從而抑製腫瘤細胞增殖活性.
목적탐토야생형p16β대체외후암Hep-2세포주기신호전도적간예작용.방법이중조선병독위재체,구건p16β적중조선병독AdEasy-GFP-p16β질립,병재293세포중포장、순화.장이순화적중조선병독AdEasy-GFP-p16β재체외전염Hep-2후암세포,채용MTT실험、류식세포술(FCM)、면역조화、Western blot등실험수단검측Hep-2세포적억제/살상작용급기세포주기신호、DNA함량、세포조망솔적변화;검측P16단백적표체화Hep-2세포적초미결구변화.결과본연구성공지구건화제비료고적도적AdEasy-GFP-p16β중조선병독,병고효지전이도Hep-2세포내화표체P16단백,유효지억제료Hep-2세포적생장.피전염적Hep-2세포피유효지조체재G0/G1기,제고료전염세포적조망솔.결론중조선병독AdEasy-GFP-p16β능고효감염Hep-2세포,표체P16단백;유효억제Hep-2세포증식;간예Hep-2세포주기적신호전도궤제화세포주기,유도조망,종이억제종류세포증식활성.
