药物生物技术
藥物生物技術
약물생물기술
PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY
2008年
2期
90-93
,共4页
吕敏%潘明洁%杨华凤%李越希
呂敏%潘明潔%楊華鳳%李越希
려민%반명길%양화봉%리월희
单纯疱疹病毒%糖蛋白B%克隆%表达
單純皰疹病毒%糖蛋白B%剋隆%錶達
단순포진병독%당단백B%극륭%표체
构建单纯疱疹病毒1型糖蛋白B(HSV1gB)胞外区基因片段的重组原核表达质粒,并获得HSV1gB胞外区基因的表达.选用真核和原核细胞均偏爱的密码子,化学合成含信号肽序列的HSV1gB蛋白胞外区基因序列,用PCR方法扩增编码HSV1gB胞外区1～696 aa的基因,利用DNA重组技术将其定向插入到原核表达载体pGEX4T-2上,转化大肠杆菌TG1菌株,经IPTG诱导表达及SDS-PAGE鉴定分析.SDS-PAGE检测显示,表达的HSV1gB/GST 融合蛋白分子质量为96 ku.利用亲和层析方法,纯化获得了表达的目的蛋白.ELISA结果表明表达产物具有较好的抗原性和特异性.可溶性重组HSV1gB蛋白的表达成功为单纯疱疹病毒亚单位疫苗的研究奠定了基础.
構建單純皰疹病毒1型糖蛋白B(HSV1gB)胞外區基因片段的重組原覈錶達質粒,併穫得HSV1gB胞外區基因的錶達.選用真覈和原覈細胞均偏愛的密碼子,化學閤成含信號肽序列的HSV1gB蛋白胞外區基因序列,用PCR方法擴增編碼HSV1gB胞外區1～696 aa的基因,利用DNA重組技術將其定嚮插入到原覈錶達載體pGEX4T-2上,轉化大腸桿菌TG1菌株,經IPTG誘導錶達及SDS-PAGE鑒定分析.SDS-PAGE檢測顯示,錶達的HSV1gB/GST 融閤蛋白分子質量為96 ku.利用親和層析方法,純化穫得瞭錶達的目的蛋白.ELISA結果錶明錶達產物具有較好的抗原性和特異性.可溶性重組HSV1gB蛋白的錶達成功為單純皰疹病毒亞單位疫苗的研究奠定瞭基礎.
구건단순포진병독1형당단백B(HSV1gB)포외구기인편단적중조원핵표체질립,병획득HSV1gB포외구기인적표체.선용진핵화원핵세포균편애적밀마자,화학합성함신호태서렬적HSV1gB단백포외구기인서렬,용PCR방법확증편마HSV1gB포외구1～696 aa적기인,이용DNA중조기술장기정향삽입도원핵표체재체pGEX4T-2상,전화대장간균TG1균주,경IPTG유도표체급SDS-PAGE감정분석.SDS-PAGE검측현시,표체적HSV1gB/GST 융합단백분자질량위96 ku.이용친화층석방법,순화획득료표체적목적단백.ELISA결과표명표체산물구유교호적항원성화특이성.가용성중조HSV1gB단백적표체성공위단순포진병독아단위역묘적연구전정료기출.
