新疆农业大学学报
新疆農業大學學報
신강농업대학학보
JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2009年
1期
18-21
,共4页
苗中秋%马素贞%谷思燚%孙其喆%简子健
苗中鞦%馬素貞%穀思燚%孫其喆%簡子健
묘중추%마소정%곡사일%손기철%간자건
环形泰勒虫%TamsⅠ基因%表达条件优化%纯化
環形泰勒蟲%TamsⅠ基因%錶達條件優化%純化
배형태륵충%TamsⅠ기인%표체조건우화%순화
为了提高新疆牛环形泰勒虫TamsⅠ基因在大肠杆菌中的表达量,研究了温度、诱导时间以及诱导剂(IPTG)浓度等不同条件对TamsⅠ融合蛋白表达量的影响.试验结果表明,大肠杆菌菌株BL21(DE3)在37 ℃培养2.5 h后,使用终浓度为2 mmol/L的IPTG在25 ℃振荡诱导培养8 h时,GST-TamsⅠ融合蛋白表达量最高,达到2.5 mg/mL.用GST-Sepharose 4B亲和层析柱对GST-TamsⅠ融合蛋白进行纯化,SDS-PAGE检测表明GST-TamsⅠ融合蛋白大小约为56 kD,与预计的分子量大小一致.TamsⅠ基因的优化表达为牛环形泰勒虫病的分子免疫学诊断和亚单位疫苗的研制奠定了基础.
為瞭提高新疆牛環形泰勒蟲TamsⅠ基因在大腸桿菌中的錶達量,研究瞭溫度、誘導時間以及誘導劑(IPTG)濃度等不同條件對TamsⅠ融閤蛋白錶達量的影響.試驗結果錶明,大腸桿菌菌株BL21(DE3)在37 ℃培養2.5 h後,使用終濃度為2 mmol/L的IPTG在25 ℃振盪誘導培養8 h時,GST-TamsⅠ融閤蛋白錶達量最高,達到2.5 mg/mL.用GST-Sepharose 4B親和層析柱對GST-TamsⅠ融閤蛋白進行純化,SDS-PAGE檢測錶明GST-TamsⅠ融閤蛋白大小約為56 kD,與預計的分子量大小一緻.TamsⅠ基因的優化錶達為牛環形泰勒蟲病的分子免疫學診斷和亞單位疫苗的研製奠定瞭基礎.
위료제고신강우배형태륵충TamsⅠ기인재대장간균중적표체량,연구료온도、유도시간이급유도제(IPTG)농도등불동조건대TamsⅠ융합단백표체량적영향.시험결과표명,대장간균균주BL21(DE3)재37 ℃배양2.5 h후,사용종농도위2 mmol/L적IPTG재25 ℃진탕유도배양8 h시,GST-TamsⅠ융합단백표체량최고,체도2.5 mg/mL.용GST-Sepharose 4B친화층석주대GST-TamsⅠ융합단백진행순화,SDS-PAGE검측표명GST-TamsⅠ융합단백대소약위56 kD,여예계적분자량대소일치.TamsⅠ기인적우화표체위우배형태륵충병적분자면역학진단화아단위역묘적연제전정료기출.
