中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2004年
4期
359-363
,共5页
田睿%余利岩%肖春玲%左联%姚天爵%杨丽霞
田睿%餘利巖%肖春玲%左聯%姚天爵%楊麗霞
전예%여리암%초춘령%좌련%요천작%양려하
绿脓杆菌%外排泵%OprM%药物筛选
綠膿桿菌%外排泵%OprM%藥物篩選
록농간균%외배빙%OprM%약물사선
目的以绿脓杆菌主动外排系统中MexAB-OprM型外排泵的外膜蛋白OprM为靶点,建立外排泵抑制剂筛选模型.方法利用PCR法从标准绿脓杆菌PAO1菌株中得到外排泵外膜蛋白基因oprM,利用T-easy载体作为克隆载体,pMMB67EH为表达载体在大肠杆菌HS151中进行OprM蛋白的诱导表达.为检测OprM蛋白的功能,采用液闪计数法测定胞内四环素浓度,纸片法进行抑菌圈测定实验,并以此为基础建立筛选模型.结果可见OprM蛋白的高表达,以其为主要检定菌,建立了一个作用于外排泵外膜OprM蛋白的药物筛选模型.累计应用此模型筛选放线菌和真菌发酵液样品1 600个,其中获得阳性菌株56个,阳性率约为3.5%.结论本研究验证了OprM蛋白对外排作用的重要性,通过筛选实验表明该模型有较好的特异性和可操作性.
目的以綠膿桿菌主動外排繫統中MexAB-OprM型外排泵的外膜蛋白OprM為靶點,建立外排泵抑製劑篩選模型.方法利用PCR法從標準綠膿桿菌PAO1菌株中得到外排泵外膜蛋白基因oprM,利用T-easy載體作為剋隆載體,pMMB67EH為錶達載體在大腸桿菌HS151中進行OprM蛋白的誘導錶達.為檢測OprM蛋白的功能,採用液閃計數法測定胞內四環素濃度,紙片法進行抑菌圈測定實驗,併以此為基礎建立篩選模型.結果可見OprM蛋白的高錶達,以其為主要檢定菌,建立瞭一箇作用于外排泵外膜OprM蛋白的藥物篩選模型.纍計應用此模型篩選放線菌和真菌髮酵液樣品1 600箇,其中穫得暘性菌株56箇,暘性率約為3.5%.結論本研究驗證瞭OprM蛋白對外排作用的重要性,通過篩選實驗錶明該模型有較好的特異性和可操作性.
목적이록농간균주동외배계통중MexAB-OprM형외배빙적외막단백OprM위파점,건립외배빙억제제사선모형.방법이용PCR법종표준록농간균PAO1균주중득도외배빙외막단백기인oprM,이용T-easy재체작위극륭재체,pMMB67EH위표체재체재대장간균HS151중진행OprM단백적유도표체.위검측OprM단백적공능,채용액섬계수법측정포내사배소농도,지편법진행억균권측정실험,병이차위기출건립사선모형.결과가견OprM단백적고표체,이기위주요검정균,건립료일개작용우외배빙외막OprM단백적약물사선모형.루계응용차모형사선방선균화진균발효액양품1 600개,기중획득양성균주56개,양성솔약위3.5%.결론본연구험증료OprM단백대외배작용적중요성,통과사선실험표명해모형유교호적특이성화가조작성.
