中国兽药杂志
中國獸藥雜誌
중국수약잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY DRUG
2007年
6期
4-8
,共5页
马凤龙%傅兴伦%乔彦良%李春荣%李朝阳%刘焕珍
馬鳳龍%傅興倫%喬彥良%李春榮%李朝暘%劉煥珍
마봉룡%부흥륜%교언량%리춘영%리조양%류환진
鸡%IFN-α基因%表达%包涵体%复性
鷄%IFN-α基因%錶達%包涵體%複性
계%IFN-α기인%표체%포함체%복성
根据GenBank中鸡IFN-α序列设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡(SPF)的IFN-α基因,命名ChIFN-Sl,与GenBank中IFN-α比较,ORF长度均为582个核苷酸,其成熟肽包含162个氨基酸,相互间同源性在98.8%～99.8%.将其成熟肽基因序列克隆入pQE30表达载体后,通过ITPG诱导,收集菌体高压破碎后提取包涵体并进行初步纯化,利用胱氨酸-半胱氨酸再氧化还原法对纯化后的变性液进行分段稀释法复性.细胞病变抑制法(CEF-VSV为检测系统)测定复性液的抗病毒比活性高达109U/mg以上.
根據GenBank中鷄IFN-α序列設計引物對,利用PCR技術剋隆併測定瞭萊航鷄(SPF)的IFN-α基因,命名ChIFN-Sl,與GenBank中IFN-α比較,ORF長度均為582箇覈苷痠,其成熟肽包含162箇氨基痠,相互間同源性在98.8%～99.8%.將其成熟肽基因序列剋隆入pQE30錶達載體後,通過ITPG誘導,收集菌體高壓破碎後提取包涵體併進行初步純化,利用胱氨痠-半胱氨痠再氧化還原法對純化後的變性液進行分段稀釋法複性.細胞病變抑製法(CEF-VSV為檢測繫統)測定複性液的抗病毒比活性高達109U/mg以上.
근거GenBank중계IFN-α서렬설계인물대,이용PCR기술극륭병측정료래항계(SPF)적IFN-α기인,명명ChIFN-Sl,여GenBank중IFN-α비교,ORF장도균위582개핵감산,기성숙태포함162개안기산,상호간동원성재98.8%～99.8%.장기성숙태기인서렬극륭입pQE30표체재체후,통과ITPG유도,수집균체고압파쇄후제취포함체병진행초보순화,이용광안산-반광안산재양화환원법대순화후적변성액진행분단희석법복성.세포병변억제법(CEF-VSV위검측계통)측정복성액적항병독비활성고체109U/mg이상.
