福建林业科技
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복건임업과기
JOURNAL OF FUJIAN FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2010年
3期
9-15
,共7页
郑志雷%李洪光%孔玲%肖永太%荣俊冬%马水旺%郑郁善
鄭誌雷%李洪光%孔玲%肖永太%榮俊鼕%馬水旺%鄭鬱善
정지뢰%리홍광%공령%초영태%영준동%마수왕%정욱선
厚朴%SRAP-PCR%建立%优化
厚樸%SRAP-PCR%建立%優化
후박%SRAP-PCR%건립%우화
利用正交试验L16(45),结合单因素试验对厚朴相关序列扩增多态性(Sequence-related amplified polymorphism,SRAP)标记反应体系的5个因素(Mg2+,dNTPs,引物,Taq酶和模板DNA)进行优化试验,结果表明:各因素水平变化对PCR 反应的影响从大到小依次为:dNTPs>Taq酶>模板DNA>Mg2+>引物;筛选出各反应因素的最佳水平,建立厚朴SRAP-PCR反应的最佳体系(25μL)为:Taq酶1.5 U,Mg2+ 1.8 mmol·L-1,模板DNA 100 ng,dNTP 0.24 mmol·L-1,引物0.40 μL.试验表明,该体系重复性好、稳定性强.
利用正交試驗L16(45),結閤單因素試驗對厚樸相關序列擴增多態性(Sequence-related amplified polymorphism,SRAP)標記反應體繫的5箇因素(Mg2+,dNTPs,引物,Taq酶和模闆DNA)進行優化試驗,結果錶明:各因素水平變化對PCR 反應的影響從大到小依次為:dNTPs>Taq酶>模闆DNA>Mg2+>引物;篩選齣各反應因素的最佳水平,建立厚樸SRAP-PCR反應的最佳體繫(25μL)為:Taq酶1.5 U,Mg2+ 1.8 mmol·L-1,模闆DNA 100 ng,dNTP 0.24 mmol·L-1,引物0.40 μL.試驗錶明,該體繫重複性好、穩定性彊.
이용정교시험L16(45),결합단인소시험대후박상관서렬확증다태성(Sequence-related amplified polymorphism,SRAP)표기반응체계적5개인소(Mg2+,dNTPs,인물,Taq매화모판DNA)진행우화시험,결과표명:각인소수평변화대PCR 반응적영향종대도소의차위:dNTPs>Taq매>모판DNA>Mg2+>인물;사선출각반응인소적최가수평,건립후박SRAP-PCR반응적최가체계(25μL)위:Taq매1.5 U,Mg2+ 1.8 mmol·L-1,모판DNA 100 ng,dNTP 0.24 mmol·L-1,인물0.40 μL.시험표명,해체계중복성호、은정성강.
