中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
1期
87-91
,共5页
张思英%王国艳%都海波%栾希英
張思英%王國豔%都海波%欒希英
장사영%왕국염%도해파%란희영
人胎盘间充质干细胞%B7H1%siRNA%黏附%迁移
人胎盤間充質榦細胞%B7H1%siRNA%黏附%遷移
인태반간충질간세포%B7H1%siRNA%점부%천이
背景:人胎盘间充质干细胞表达的共刺激分子B7H1在其负性免疫调节作用中发挥着重要作用,但B7H1对人胎盘间充质干细胞生物学行为的影响尚未见报道.目的:观察阻断B7H1对人胎盘间充质干细胞黏附和迁移的影响.方法:采用消化法分离、培养人胎盘间充质干细胞,体外扩增培养3代后用于实验.用流式细胞仪及RT-PCR检测人胎盘间充质干细胞对B7H1的表达.用阳离子脂质体法将针对B7H1的siRNA转染入细胞,应用RT-PCR法检测B7H1基因在mRNA水平的变化.然后应用细胞计数法检测人胎盘间充质干细胞的黏附能力,Transwell法检测迁移能力.结果与结论:人胎盘间充质干细胞高表达B7H1,siRNA转染能有效阻断B7H1的表达;接种后0.5 h阻断组人胎盘间充质干细胞的黏附率与对照组相比差异无显著性意义,但在接种后1,3 h阻断组细胞黏附率均明显高于对照组(P < 0.05);Transwell检测结果显示,在SDF-1α单独存在条件下、DMEM-LG完全培养基或者人胎盘间充质干细胞培养上清条件下,阻断组细胞的迁移数量均比对照组显著减少(P < 0.01).结果表明阻断B7H1的表达后,人胎盘间充质干细胞的黏附能力增强,而迁移能力受到抑制.提示B7H1在人胎盘间充质干细胞的黏附和迁移中发挥重要作用.
揹景:人胎盤間充質榦細胞錶達的共刺激分子B7H1在其負性免疫調節作用中髮揮著重要作用,但B7H1對人胎盤間充質榦細胞生物學行為的影響尚未見報道.目的:觀察阻斷B7H1對人胎盤間充質榦細胞黏附和遷移的影響.方法:採用消化法分離、培養人胎盤間充質榦細胞,體外擴增培養3代後用于實驗.用流式細胞儀及RT-PCR檢測人胎盤間充質榦細胞對B7H1的錶達.用暘離子脂質體法將針對B7H1的siRNA轉染入細胞,應用RT-PCR法檢測B7H1基因在mRNA水平的變化.然後應用細胞計數法檢測人胎盤間充質榦細胞的黏附能力,Transwell法檢測遷移能力.結果與結論:人胎盤間充質榦細胞高錶達B7H1,siRNA轉染能有效阻斷B7H1的錶達;接種後0.5 h阻斷組人胎盤間充質榦細胞的黏附率與對照組相比差異無顯著性意義,但在接種後1,3 h阻斷組細胞黏附率均明顯高于對照組(P < 0.05);Transwell檢測結果顯示,在SDF-1α單獨存在條件下、DMEM-LG完全培養基或者人胎盤間充質榦細胞培養上清條件下,阻斷組細胞的遷移數量均比對照組顯著減少(P < 0.01).結果錶明阻斷B7H1的錶達後,人胎盤間充質榦細胞的黏附能力增彊,而遷移能力受到抑製.提示B7H1在人胎盤間充質榦細胞的黏附和遷移中髮揮重要作用.
배경:인태반간충질간세포표체적공자격분자B7H1재기부성면역조절작용중발휘착중요작용,단B7H1대인태반간충질간세포생물학행위적영향상미견보도.목적:관찰조단B7H1대인태반간충질간세포점부화천이적영향.방법:채용소화법분리、배양인태반간충질간세포,체외확증배양3대후용우실험.용류식세포의급RT-PCR검측인태반간충질간세포대B7H1적표체.용양리자지질체법장침대B7H1적siRNA전염입세포,응용RT-PCR법검측B7H1기인재mRNA수평적변화.연후응용세포계수법검측인태반간충질간세포적점부능력,Transwell법검측천이능력.결과여결론:인태반간충질간세포고표체B7H1,siRNA전염능유효조단B7H1적표체;접충후0.5 h조단조인태반간충질간세포적점부솔여대조조상비차이무현저성의의,단재접충후1,3 h조단조세포점부솔균명현고우대조조(P < 0.05);Transwell검측결과현시,재SDF-1α단독존재조건하、DMEM-LG완전배양기혹자인태반간충질간세포배양상청조건하,조단조세포적천이수량균비대조조현저감소(P < 0.01).결과표명조단B7H1적표체후,인태반간충질간세포적점부능력증강,이천이능력수도억제.제시B7H1재인태반간충질간세포적점부화천이중발휘중요작용.