华南理工大学学报（自然科学版）
華南理工大學學報（自然科學版）
화남리공대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SOUTH CHINA UNIVERSITY OF TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2011年
5期
138-142
,共5页
柳忠玉%庄楚雄%生书晶%邵利%赵树进
柳忠玉%莊楚雄%生書晶%邵利%趙樹進
류충옥%장초웅%생서정%소리%조수진
虎杖%白藜芦醇合酶%转基因%拟南芥%白藜芦醇%白藜芦醇苷
虎杖%白藜蘆醇閤酶%轉基因%擬南芥%白藜蘆醇%白藜蘆醇苷
호장%백려호순합매%전기인%의남개%백려호순%백려호순감
为验证虎杖白藜芦醇合酶基因PcRS在转基因植物中合成白藜芦醇的有效性,构建了植物表达载体pCAM1380-35S-PcRS,通过农杆菌介导,利用花序浸泡法转化拟南芥.转化子在含有潮霉素的培养基上经筛选后,利用PCR和Southerrn杂交技术检测,进一步证实PcRS基因已整合到拟南芥基因组.经过选育得到了遗传稳定的T3代纯合子转基因拟南芥株系.Northern杂交证实外源基因在转基因拟南芥纯合子株系中实现表达,并且通过HPLC法检测到终产物是反式白藜芦醇苷.两周大拟南芥幼苗产生的反式白藜芦醇苷为136μg/g(鲜重),千重为1813μg/g.
為驗證虎杖白藜蘆醇閤酶基因PcRS在轉基因植物中閤成白藜蘆醇的有效性,構建瞭植物錶達載體pCAM1380-35S-PcRS,通過農桿菌介導,利用花序浸泡法轉化擬南芥.轉化子在含有潮黴素的培養基上經篩選後,利用PCR和Southerrn雜交技術檢測,進一步證實PcRS基因已整閤到擬南芥基因組.經過選育得到瞭遺傳穩定的T3代純閤子轉基因擬南芥株繫.Northern雜交證實外源基因在轉基因擬南芥純閤子株繫中實現錶達,併且通過HPLC法檢測到終產物是反式白藜蘆醇苷.兩週大擬南芥幼苗產生的反式白藜蘆醇苷為136μg/g(鮮重),韆重為1813μg/g.
위험증호장백려호순합매기인PcRS재전기인식물중합성백려호순적유효성,구건료식물표체재체pCAM1380-35S-PcRS,통과농간균개도,이용화서침포법전화의남개.전화자재함유조매소적배양기상경사선후,이용PCR화Southerrn잡교기술검측,진일보증실PcRS기인이정합도의남개기인조.경과선육득도료유전은정적T3대순합자전기인의남개주계.Northern잡교증실외원기인재전기인의남개순합자주계중실현표체,병차통과HPLC법검측도종산물시반식백려호순감.량주대의남개유묘산생적반식백려호순감위136μg/g(선중),천중위1813μg/g.
