中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
12期
2120-2124
,共5页
卢华定%吕璐璐%赵慧清%王昆
盧華定%呂璐璐%趙慧清%王昆
로화정%려로로%조혜청%왕곤
转化生长因子β1%壳聚糖%软骨细胞%组织工程%基因载体
轉化生長因子β1%殼聚糖%軟骨細胞%組織工程%基因載體
전화생장인자β1%각취당%연골세포%조직공정%기인재체
背景:壳聚糖作为一种非病毒载体,具有低毒性、低免疫原性、良好的生物相容性以及带可高正电荷密度的特性,易与带负电荷的DNA通过静电作用形成相互作用体避免核酸酶的降解.目的:构建负载重组人转化生长因子β1基因的壳聚糖纳米粒,检测其体外缓释转化生长因子β1基因及对软骨细胞基因转染等性能.方法:将壳聚糖与负载增强型绿色荧光蛋白基因和转化生长因子β1基因的质粒DNA(pDNA)以复凝聚法制成壳聚糖/ pEGFP-TGF-β1纳米粒.结果与结论:制备的壳聚糖/pEGFP-TGF-β1纳米粒呈球形,粒径、表面电位与pH值相关,随着pH值升高,粒径增大,表面电位减少.纳米粒可有效保护pDNA免受核酸酶的降解.纳米粒的pDNA包封率为(87.5±2.3)%;pDNA可从纳米粒中缓慢释放.体外转染实验证实壳聚糖/pEGFP-TGF-β1纳米粒能转染软骨细胞并在细胞内表达绿色荧光蛋白.提示壳聚糖/ pEGFP-TGF-β1纳米粒能有效保护pDNA免受核酸酶降解,具有良好的缓释转化生长因子β1基因的能力,并能介导基因转染软骨细胞.
揹景:殼聚糖作為一種非病毒載體,具有低毒性、低免疫原性、良好的生物相容性以及帶可高正電荷密度的特性,易與帶負電荷的DNA通過靜電作用形成相互作用體避免覈痠酶的降解.目的:構建負載重組人轉化生長因子β1基因的殼聚糖納米粒,檢測其體外緩釋轉化生長因子β1基因及對軟骨細胞基因轉染等性能.方法:將殼聚糖與負載增彊型綠色熒光蛋白基因和轉化生長因子β1基因的質粒DNA(pDNA)以複凝聚法製成殼聚糖/ pEGFP-TGF-β1納米粒.結果與結論:製備的殼聚糖/pEGFP-TGF-β1納米粒呈毬形,粒徑、錶麵電位與pH值相關,隨著pH值升高,粒徑增大,錶麵電位減少.納米粒可有效保護pDNA免受覈痠酶的降解.納米粒的pDNA包封率為(87.5±2.3)%;pDNA可從納米粒中緩慢釋放.體外轉染實驗證實殼聚糖/pEGFP-TGF-β1納米粒能轉染軟骨細胞併在細胞內錶達綠色熒光蛋白.提示殼聚糖/ pEGFP-TGF-β1納米粒能有效保護pDNA免受覈痠酶降解,具有良好的緩釋轉化生長因子β1基因的能力,併能介導基因轉染軟骨細胞.
배경:각취당작위일충비병독재체,구유저독성、저면역원성、량호적생물상용성이급대가고정전하밀도적특성,역여대부전하적DNA통과정전작용형성상호작용체피면핵산매적강해.목적:구건부재중조인전화생장인자β1기인적각취당납미립,검측기체외완석전화생장인자β1기인급대연골세포기인전염등성능.방법:장각취당여부재증강형록색형광단백기인화전화생장인자β1기인적질립DNA(pDNA)이복응취법제성각취당/ pEGFP-TGF-β1납미립.결과여결론:제비적각취당/pEGFP-TGF-β1납미립정구형,립경、표면전위여pH치상관,수착pH치승고,립경증대,표면전위감소.납미립가유효보호pDNA면수핵산매적강해.납미립적pDNA포봉솔위(87.5±2.3)%;pDNA가종납미립중완만석방.체외전염실험증실각취당/pEGFP-TGF-β1납미립능전염연골세포병재세포내표체록색형광단백.제시각취당/ pEGFP-TGF-β1납미립능유효보호pDNA면수핵산매강해,구유량호적완석전화생장인자β1기인적능력,병능개도기인전염연골세포.
