海南医学
海南醫學
해남의학
HAINAN MEDICAL JOURNAL
2012年
20期
18-21
,共4页
朱恒梅%祝胜郎%陈结慧%叶玲%蒋莹%李向阳
硃恆梅%祝勝郎%陳結慧%葉玲%蔣瑩%李嚮暘
주항매%축성랑%진결혜%협령%장형%리향양
系膜细胞%PARP%高糖%tPA/PAI-1%纤溶系统
繫膜細胞%PARP%高糖%tPA/PAI-1%纖溶繫統
계막세포%PARP%고당%tPA/PAI-1%섬용계통
目的 探讨多聚二磷酸腺苷(ADP)核糖聚合酶-1(PARP-1)在高糖(25 mmol/L)作用下大鼠肾脏系膜细胞tPA/PAI-1纤溶系统紊乱中的作用.方法 (1)体外培养大鼠肾脏系膜细胞株(MCs 1097),使用高糖(25 mmol/L)处理大鼠肾脏系膜细胞,部分实验组中应用PARP-1特异性抑制剂PJ34(3×10-6 mol/L)进行干预处理.(2) RT-PCR及Western blot检测PARP-1的mRNA及蛋白表达.(3)高通量比色测定法检测PARP-1的活性.(4) ELISA法测定细胞上清液tPA、PAI-1的分泌蛋白.结果 (1)高糖显著诱导大鼠肾脏系膜细胞PARP-1mRNA和蛋白的表达,PJ-34可明显抑制高糖诱导的PARP-1 mRNA和蛋白的过度表达.同时,高糖显著诱导大鼠肾脏系膜细胞PARP-1激活,PJ-34可显著抑制高糖诱导的PARP激活.(2)高糖轻度减少大鼠肾脏系膜细胞分泌型tPA的蛋白表达,显著增加大鼠肾脏系膜细胞分泌型PAI-1的蛋白表达,导致tPA/PAI-1比值降低,PJ-34显著预防高糖诱导的上述改变.结论 高糖可以诱导培养的大鼠肾脏系膜细胞内PARP激活,PARP1表达增加,PJ-34预处理可以明显降低高糖诱导的大鼠肾脏系膜细胞内PARP的激活以及下游tPA/PAI-1纤溶系统紊乱,提示高糖可能通过过度激活PARP来诱导tPA/PAI-1功能紊乱.
目的 探討多聚二燐痠腺苷(ADP)覈糖聚閤酶-1(PARP-1)在高糖(25 mmol/L)作用下大鼠腎髒繫膜細胞tPA/PAI-1纖溶繫統紊亂中的作用.方法 (1)體外培養大鼠腎髒繫膜細胞株(MCs 1097),使用高糖(25 mmol/L)處理大鼠腎髒繫膜細胞,部分實驗組中應用PARP-1特異性抑製劑PJ34(3×10-6 mol/L)進行榦預處理.(2) RT-PCR及Western blot檢測PARP-1的mRNA及蛋白錶達.(3)高通量比色測定法檢測PARP-1的活性.(4) ELISA法測定細胞上清液tPA、PAI-1的分泌蛋白.結果 (1)高糖顯著誘導大鼠腎髒繫膜細胞PARP-1mRNA和蛋白的錶達,PJ-34可明顯抑製高糖誘導的PARP-1 mRNA和蛋白的過度錶達.同時,高糖顯著誘導大鼠腎髒繫膜細胞PARP-1激活,PJ-34可顯著抑製高糖誘導的PARP激活.(2)高糖輕度減少大鼠腎髒繫膜細胞分泌型tPA的蛋白錶達,顯著增加大鼠腎髒繫膜細胞分泌型PAI-1的蛋白錶達,導緻tPA/PAI-1比值降低,PJ-34顯著預防高糖誘導的上述改變.結論 高糖可以誘導培養的大鼠腎髒繫膜細胞內PARP激活,PARP1錶達增加,PJ-34預處理可以明顯降低高糖誘導的大鼠腎髒繫膜細胞內PARP的激活以及下遊tPA/PAI-1纖溶繫統紊亂,提示高糖可能通過過度激活PARP來誘導tPA/PAI-1功能紊亂.
목적 탐토다취이린산선감(ADP)핵당취합매-1(PARP-1)재고당(25 mmol/L)작용하대서신장계막세포tPA/PAI-1섬용계통문란중적작용.방법 (1)체외배양대서신장계막세포주(MCs 1097),사용고당(25 mmol/L)처리대서신장계막세포,부분실험조중응용PARP-1특이성억제제PJ34(3×10-6 mol/L)진행간예처리.(2) RT-PCR급Western blot검측PARP-1적mRNA급단백표체.(3)고통량비색측정법검측PARP-1적활성.(4) ELISA법측정세포상청액tPA、PAI-1적분비단백.결과 (1)고당현저유도대서신장계막세포PARP-1mRNA화단백적표체,PJ-34가명현억제고당유도적PARP-1 mRNA화단백적과도표체.동시,고당현저유도대서신장계막세포PARP-1격활,PJ-34가현저억제고당유도적PARP격활.(2)고당경도감소대서신장계막세포분비형tPA적단백표체,현저증가대서신장계막세포분비형PAI-1적단백표체,도치tPA/PAI-1비치강저,PJ-34현저예방고당유도적상술개변.결론 고당가이유도배양적대서신장계막세포내PARP격활,PARP1표체증가,PJ-34예처리가이명현강저고당유도적대서신장계막세포내PARP적격활이급하유tPA/PAI-1섬용계통문란,제시고당가능통과과도격활PARP래유도tPA/PAI-1공능문란.