中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2002年
4期
461-464
,共4页
陈海旭%邹冠玉%屈贤铭%杨胜利
陳海旭%鄒冠玉%屈賢銘%楊勝利
진해욱%추관옥%굴현명%양성리
抗菌肽%酵母表达%magainin%pPIC3
抗菌肽%酵母錶達%magainin%pPIC3
항균태%효모표체%magainin%pPIC3
用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的抗菌肽magainin基因片段,合成片段拼接后,与pUC19重组,获得magainin基因.Magainin基因与酵母表达载体pPIC3重组,构建胞内表达载体pPIC3-Mag,电击法转化GS115宿主菌,经表型筛选和PCR鉴定证实了目的基因已稳定整合入Pichia pastoris酵母基因组中.阳性克隆用甲醇诱导表达,用免疫印迹法确定了产物的正确性.利用琼脂孔穴扩散法和液相测定法证明了重组magainin具有抗菌活性.
用化學閤成法閤成瞭以酵母偏愛密碼子編碼的抗菌肽magainin基因片段,閤成片段拼接後,與pUC19重組,穫得magainin基因.Magainin基因與酵母錶達載體pPIC3重組,構建胞內錶達載體pPIC3-Mag,電擊法轉化GS115宿主菌,經錶型篩選和PCR鑒定證實瞭目的基因已穩定整閤入Pichia pastoris酵母基因組中.暘性剋隆用甲醇誘導錶達,用免疫印跡法確定瞭產物的正確性.利用瓊脂孔穴擴散法和液相測定法證明瞭重組magainin具有抗菌活性.
용화학합성법합성료이효모편애밀마자편마적항균태magainin기인편단,합성편단병접후,여pUC19중조,획득magainin기인.Magainin기인여효모표체재체pPIC3중조,구건포내표체재체pPIC3-Mag,전격법전화GS115숙주균,경표형사선화PCR감정증실료목적기인이은정정합입Pichia pastoris효모기인조중.양성극륭용갑순유도표체,용면역인적법학정료산물적정학성.이용경지공혈확산법화액상측정법증명료중조magainin구유항균활성.
