中国动脉硬化杂志
中國動脈硬化雜誌
중국동맥경화잡지
CHINESE JOURNAL OF ARTERIOSCLEROSIS
2003年
6期
512-516
,共5页
周法光%吴可贵%林明%王向宇%许昌生%王华军
週法光%吳可貴%林明%王嚮宇%許昌生%王華軍
주법광%오가귀%림명%왕향우%허창생%왕화군
分子生物学%反义cDNA抑制胶原合成%转染技术%血管紧张素转化酶%脂质体%心脏成纤维细胞%胶原合成
分子生物學%反義cDNA抑製膠原閤成%轉染技術%血管緊張素轉化酶%脂質體%心髒成纖維細胞%膠原閤成
분자생물학%반의cDNA억제효원합성%전염기술%혈관긴장소전화매%지질체%심장성섬유세포%효원합성
为研究血管紧张素转化酶反义cDNA对心脏成纤维细胞胶原合成的影响,以脂质体为载体,用血管紧张素转化酶反义cDNA转染体外培养的自发性高血压大鼠心脏成纤维细胞,测定3H-脯氨酸掺入率以评价对心脏成纤维细胞胶原合成的作用.用反转录聚合酶链反应检测反义基因的表达,及其对血管紧张素转化酶基因表达的影响,同时检测细胞血管紧张素转化酶活性的变化.血管紧张素转化酶反义cDNA能在心脏成纤维细胞中表达,在转染后第4天达到表达高峰,至少持续1周,能减少自发性高血压大鼠心脏成纤维细胞的血管紧张素转化酶mRNA的表达,且减少程度与反义cDNA的表达水平呈正相关;转染能减少自发性高血压大鼠心脏成纤维细胞的血管紧张素转化酶活性(14.23±1.62比26.53±2.50 u/105个细胞,P<0.05),但对Wistar Kyoto大鼠细胞血管紧张素转化酶活性无明显影响(P>0.05);反义cDNA明显减少自发性高血压大鼠心脏成纤维细胞3H-脯氨酸掺入率(4 355.7±75.9比6 310.3±98.9 cpm/105个细胞,P<0.01),但对Wistar Kyoto大鼠心脏成纤维细胞3H-脯氨酸掺入率无明显影响(P>0.05).以脂质体为载体,血管紧张素转化酶反义核酸能抑制自发性高血压大鼠心脏成纤维细胞过高的基础胶原合成活性.提示血管紧张素转化酶反义核酸在胶原合成增多的相关疾病治疗中有潜在的价值.
為研究血管緊張素轉化酶反義cDNA對心髒成纖維細胞膠原閤成的影響,以脂質體為載體,用血管緊張素轉化酶反義cDNA轉染體外培養的自髮性高血壓大鼠心髒成纖維細胞,測定3H-脯氨痠摻入率以評價對心髒成纖維細胞膠原閤成的作用.用反轉錄聚閤酶鏈反應檢測反義基因的錶達,及其對血管緊張素轉化酶基因錶達的影響,同時檢測細胞血管緊張素轉化酶活性的變化.血管緊張素轉化酶反義cDNA能在心髒成纖維細胞中錶達,在轉染後第4天達到錶達高峰,至少持續1週,能減少自髮性高血壓大鼠心髒成纖維細胞的血管緊張素轉化酶mRNA的錶達,且減少程度與反義cDNA的錶達水平呈正相關;轉染能減少自髮性高血壓大鼠心髒成纖維細胞的血管緊張素轉化酶活性(14.23±1.62比26.53±2.50 u/105箇細胞,P<0.05),但對Wistar Kyoto大鼠細胞血管緊張素轉化酶活性無明顯影響(P>0.05);反義cDNA明顯減少自髮性高血壓大鼠心髒成纖維細胞3H-脯氨痠摻入率(4 355.7±75.9比6 310.3±98.9 cpm/105箇細胞,P<0.01),但對Wistar Kyoto大鼠心髒成纖維細胞3H-脯氨痠摻入率無明顯影響(P>0.05).以脂質體為載體,血管緊張素轉化酶反義覈痠能抑製自髮性高血壓大鼠心髒成纖維細胞過高的基礎膠原閤成活性.提示血管緊張素轉化酶反義覈痠在膠原閤成增多的相關疾病治療中有潛在的價值.
위연구혈관긴장소전화매반의cDNA대심장성섬유세포효원합성적영향,이지질체위재체,용혈관긴장소전화매반의cDNA전염체외배양적자발성고혈압대서심장성섬유세포,측정3H-포안산참입솔이평개대심장성섬유세포효원합성적작용.용반전록취합매련반응검측반의기인적표체,급기대혈관긴장소전화매기인표체적영향,동시검측세포혈관긴장소전화매활성적변화.혈관긴장소전화매반의cDNA능재심장성섬유세포중표체,재전염후제4천체도표체고봉,지소지속1주,능감소자발성고혈압대서심장성섬유세포적혈관긴장소전화매mRNA적표체,차감소정도여반의cDNA적표체수평정정상관;전염능감소자발성고혈압대서심장성섬유세포적혈관긴장소전화매활성(14.23±1.62비26.53±2.50 u/105개세포,P<0.05),단대Wistar Kyoto대서세포혈관긴장소전화매활성무명현영향(P>0.05);반의cDNA명현감소자발성고혈압대서심장성섬유세포3H-포안산참입솔(4 355.7±75.9비6 310.3±98.9 cpm/105개세포,P<0.01),단대Wistar Kyoto대서심장성섬유세포3H-포안산참입솔무명현영향(P>0.05).이지질체위재체,혈관긴장소전화매반의핵산능억제자발성고혈압대서심장성섬유세포과고적기출효원합성활성.제시혈관긴장소전화매반의핵산재효원합성증다적상관질병치료중유잠재적개치.