中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2005年
4期
434-437
,共4页
朱常香%宋云枝%王玫玫%王秀芳%温孚江
硃常香%宋雲枝%王玫玫%王秀芳%溫孚江
주상향%송운지%왕매매%왕수방%온부강
烟草环斑病毒%外壳蛋白基因%原核表达%抗血清
煙草環斑病毒%外殼蛋白基因%原覈錶達%抗血清
연초배반병독%외각단백기인%원핵표체%항혈청
烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是我国二类进境检疫危险性有害生物,对农业生产危害较大.本研究依据TRSV外壳蛋白基因cp序列设计合成了2条引物,通过RT PCR扩增得到长约1500bp的目的片段.将目的片段与质粒pET-22b(+)连接,构建了含TRSV cp基因的融合蛋白原核表达载体pETRSV-CP.序列分析表明,TRSV-SD1的cp基因全长1548bp,编码515个氨基酸与GenBank中其它TRSV分离物cp基因相比,核苷酸及推导的氨基酸序列同源性为90.7%～94.6%.将pETRSV-CP转入大肠杆菌,诱导表达.SDS-PAGE结果显示,表达的TRSV CP融合蛋白的相对分子质量约为58kDa.以此融合蛋白制备的抗血清的效价为1/1024,抗血清与TRSV具有良好的特异性反应.
煙草環斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)是我國二類進境檢疫危險性有害生物,對農業生產危害較大.本研究依據TRSV外殼蛋白基因cp序列設計閤成瞭2條引物,通過RT PCR擴增得到長約1500bp的目的片段.將目的片段與質粒pET-22b(+)連接,構建瞭含TRSV cp基因的融閤蛋白原覈錶達載體pETRSV-CP.序列分析錶明,TRSV-SD1的cp基因全長1548bp,編碼515箇氨基痠與GenBank中其它TRSV分離物cp基因相比,覈苷痠及推導的氨基痠序列同源性為90.7%～94.6%.將pETRSV-CP轉入大腸桿菌,誘導錶達.SDS-PAGE結果顯示,錶達的TRSV CP融閤蛋白的相對分子質量約為58kDa.以此融閤蛋白製備的抗血清的效價為1/1024,抗血清與TRSV具有良好的特異性反應.
연초배반병독(Tobacco ringspot virus,TRSV)시아국이류진경검역위험성유해생물,대농업생산위해교대.본연구의거TRSV외각단백기인cp서렬설계합성료2조인물,통과RT PCR확증득도장약1500bp적목적편단.장목적편단여질립pET-22b(+)련접,구건료함TRSV cp기인적융합단백원핵표체재체pETRSV-CP.서렬분석표명,TRSV-SD1적cp기인전장1548bp,편마515개안기산여GenBank중기타TRSV분리물cp기인상비,핵감산급추도적안기산서렬동원성위90.7%～94.6%.장pETRSV-CP전입대장간균,유도표체.SDS-PAGE결과현시,표체적TRSV CP융합단백적상대분자질량약위58kDa.이차융합단백제비적항혈청적효개위1/1024,항혈청여TRSV구유량호적특이성반응.
