第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2006年
10期
1022-1025
,共4页
星懿展%李泽桂%李红丽%李铁石%丁震宇
星懿展%李澤桂%李紅麗%李鐵石%丁震宇
성의전%리택계%리홍려%리철석%정진우
pBS/U6/STAT3-siRNA%STAT3%RNAi%小鼠
pBS/U6/STAT3-siRNA%STAT3%RNAi%小鼠
pBS/U6/STAT3-siRNA%STAT3%RNAi%소서
目的构建小鼠STAT3基因的特异性RNA干扰质粒,并鉴定其在细胞水平的抑制效果.方法采用DNA载体介导的RNA干扰技术构建小鼠STAT3基因的特异性RNAi质粒(pBS/U6/STAT3-siRNA),并通过RT-PCR、免疫印迹、免疫细胞化学染色等技术对pBS/U6/STAT3-siRNA的抑制效率进行鉴定.结果经双酶切鉴定筛选出4个阳性干扰质粒,分别转入293T细胞后均可明显降低STAT3的表达,尤以靶向(+2 334~+2 351)位点的质粒干扰效率最高,达70%.结论小鼠STAT3基因的特异性干扰质粒(pBS/U6/STAT3-siRNA)能从蛋白及mRNA水平上特异和高效地抑制STAT3基因的表达.这种DNA载体介导的双链RNA干扰质粒为进一步探究STAT3与胚胎发育的相关功能提供一种有效的研究工具.
目的構建小鼠STAT3基因的特異性RNA榦擾質粒,併鑒定其在細胞水平的抑製效果.方法採用DNA載體介導的RNA榦擾技術構建小鼠STAT3基因的特異性RNAi質粒(pBS/U6/STAT3-siRNA),併通過RT-PCR、免疫印跡、免疫細胞化學染色等技術對pBS/U6/STAT3-siRNA的抑製效率進行鑒定.結果經雙酶切鑒定篩選齣4箇暘性榦擾質粒,分彆轉入293T細胞後均可明顯降低STAT3的錶達,尤以靶嚮(+2 334~+2 351)位點的質粒榦擾效率最高,達70%.結論小鼠STAT3基因的特異性榦擾質粒(pBS/U6/STAT3-siRNA)能從蛋白及mRNA水平上特異和高效地抑製STAT3基因的錶達.這種DNA載體介導的雙鏈RNA榦擾質粒為進一步探究STAT3與胚胎髮育的相關功能提供一種有效的研究工具.
목적구건소서STAT3기인적특이성RNA간우질립,병감정기재세포수평적억제효과.방법채용DNA재체개도적RNA간우기술구건소서STAT3기인적특이성RNAi질립(pBS/U6/STAT3-siRNA),병통과RT-PCR、면역인적、면역세포화학염색등기술대pBS/U6/STAT3-siRNA적억제효솔진행감정.결과경쌍매절감정사선출4개양성간우질립,분별전입293T세포후균가명현강저STAT3적표체,우이파향(+2 334~+2 351)위점적질립간우효솔최고,체70%.결론소서STAT3기인적특이성간우질립(pBS/U6/STAT3-siRNA)능종단백급mRNA수평상특이화고효지억제STAT3기인적표체.저충DNA재체개도적쌍련RNA간우질립위진일보탐구STAT3여배태발육적상관공능제공일충유효적연구공구.