赤羽病毒G1基因的真核表达及抗原性检测
적우병독G1기인적진핵표체급항원성검측
Eukaryotic expression of Akabane virus G1 gene
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2008年 6期 440-444 ,共5页

    徐树兰%童铁钢%白宇%王群%张维军%孙庆歌%吴东来

    서수란%동철강%백우%왕군%장유군%손경가%오동래

    赤羽病毒%G1基因%表达 赤羽病毒%G1基因%錶達
    적우병독%G1기인%표체
    通过RT-PCR获得赤羽病毒(AKAV)OBE-1株的G1基因,克隆至pMD18-T载体.经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的pFastBacHTA转移栽体质粒中,利用Tn7转座子与穿梭载体Bacmid DNA同源重组,获得了重组杆状病毒DNA,用CELLFECTIN介导其转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BAC-G1P1.SDS-PAGE结果表明,感染BAC-G1P1后的Sf9昆虫细胞表达可溶形式的120 ku目的蛋白,其大小与预期相符.Western blot和间接免疫荧光试验显示表达产物具有良好的免疫学活性.
    통과RT-PCR획득적우병독(AKAV)OBE-1주적G1기인,극륭지pMD18-T재체.경측서감정정학후,장해편단작위목적기인아극륭지Bac-to-Bac간상병독표체계통중적pFastBacHTA전이재체질립중,이용Tn7전좌자여천사재체Bacmid DNA동원중조,획득료중조간상병독DNA,용CELLFECTIN개도기전염Sf9곤충세포,획득중조간상병독BAC-G1P1.SDS-PAGE결과표명,감염BAC-G1P1후적Sf9곤충세포표체가용형식적120 ku목적단백,기대소여예기상부.Western blot화간접면역형광시험현시표체산물구유량호적면역학활성.
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