安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
2期
519-521
,共3页
丁志丽%采克俊%刘莉%张易祥%张念慈
丁誌麗%採剋俊%劉莉%張易祥%張唸慈
정지려%채극준%류리%장역상%장념자
鸡胚%原始生殖细胞%培养
鷄胚%原始生殖細胞%培養
계배%원시생식세포%배양
[目的]进一步优化生殖细胞(PGCs)细胞体外培养条件. [方法]从第28期(5.5 d)鸡胚生殖嵴分离PGCs,将PGCs与性腺基质细胞共培养进行原代培养,比较2种培养温度和3种培养浓度对PGCs原代培养的影响,以及2种饲养层细胞对PGCs传代培养的影响,并通过倒置显微镜下形态学观察、碱性磷酸酶(AKP)和过碘酸希夫反应(PAS)染色方法鉴定PGCs.[结果]培养浓度为2.5×105个/ml和培养温度为37 ℃时PGCs增殖较多,不易分化,存活能力较强,以第2代鸡胚成纤维细胞作饲养层时传代培养效果较好,获得了PGCs增殖的未分化集落,为后期的细胞标记及移植研究提供了较多数量和较高活力的PGCs.[结论]获得了PGCs原代与传代培养较好的培养体系,为禽类EG细胞系的建立和转基因研究奠定了基础.
[目的]進一步優化生殖細胞(PGCs)細胞體外培養條件. [方法]從第28期(5.5 d)鷄胚生殖嵴分離PGCs,將PGCs與性腺基質細胞共培養進行原代培養,比較2種培養溫度和3種培養濃度對PGCs原代培養的影響,以及2種飼養層細胞對PGCs傳代培養的影響,併通過倒置顯微鏡下形態學觀察、堿性燐痠酶(AKP)和過碘痠希伕反應(PAS)染色方法鑒定PGCs.[結果]培養濃度為2.5×105箇/ml和培養溫度為37 ℃時PGCs增殖較多,不易分化,存活能力較彊,以第2代鷄胚成纖維細胞作飼養層時傳代培養效果較好,穫得瞭PGCs增殖的未分化集落,為後期的細胞標記及移植研究提供瞭較多數量和較高活力的PGCs.[結論]穫得瞭PGCs原代與傳代培養較好的培養體繫,為禽類EG細胞繫的建立和轉基因研究奠定瞭基礎.
[목적]진일보우화생식세포(PGCs)세포체외배양조건. [방법]종제28기(5.5 d)계배생식척분리PGCs,장PGCs여성선기질세포공배양진행원대배양,비교2충배양온도화3충배양농도대PGCs원대배양적영향,이급2충사양층세포대PGCs전대배양적영향,병통과도치현미경하형태학관찰、감성린산매(AKP)화과전산희부반응(PAS)염색방법감정PGCs.[결과]배양농도위2.5×105개/ml화배양온도위37 ℃시PGCs증식교다,불역분화,존활능력교강,이제2대계배성섬유세포작사양층시전대배양효과교호,획득료PGCs증식적미분화집락,위후기적세포표기급이식연구제공료교다수량화교고활력적PGCs.[결론]획득료PGCs원대여전대배양교호적배양체계,위금류EG세포계적건립화전기인연구전정료기출.
