自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2009年
5期
498-504
,共7页
杨粤军%周桂凤%李旭%李彦%萧小鹃%郭新红%刘选明
楊粵軍%週桂鳳%李旭%李彥%蕭小鵑%郭新紅%劉選明
양월군%주계봉%리욱%리언%소소견%곽신홍%류선명
拟南芥%隐花素突变体%蛋白质组学%半定量RT-PCR
擬南芥%隱花素突變體%蛋白質組學%半定量RT-PCR
의남개%은화소돌변체%단백질조학%반정량RT-PCR
隐花素是植物的蓝光受体,在植物中调节多种光形态建成,包括抑制下胚轴的伸长、子叶的伸展和调节植物的开花时间等,但隐花素依赖蓝光调节光形态建成的分子机制仍然不清楚.采用双向凝胶电泳对生长在白光下的拟南芥隐花素双突变体及野生型的幼苗全蛋白进行分离,通过考马斯亮蓝染色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.选取了55个差异蛋白质点采用MALDI-TOF-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,最终有33个蛋白质点得到了可靠鉴定.其中在crylcry2中相对于野生型下调的有9个蛋白,其他蛋白均表现为上调.这些在白光处理下差异表达的蛋白质主要是参与碳水化合物代谢、能量代谢、细胞组织结构、抵抗压力和解毒、蛋白质的折叠和细胞壁的形成等功能,而且亚细胞定位主要是在叶绿体和线粒体.对其中5个蛋白质点的基因进行了半定量RT-PCR分析,发现这几个蛋白质点的表达与基因的表达基本一致.这些分析结果表明光控制拟南芥的发育是通过共调节许多相关基因的表达而实现的.
隱花素是植物的藍光受體,在植物中調節多種光形態建成,包括抑製下胚軸的伸長、子葉的伸展和調節植物的開花時間等,但隱花素依賴藍光調節光形態建成的分子機製仍然不清楚.採用雙嚮凝膠電泳對生長在白光下的擬南芥隱花素雙突變體及野生型的幼苗全蛋白進行分離,通過攷馬斯亮藍染色,穫得瞭分辨率和重複性較好的雙嚮電泳圖譜.選取瞭55箇差異蛋白質點採用MALDI-TOF-TOF-MS進行肽質譜指紋圖分析,最終有33箇蛋白質點得到瞭可靠鑒定.其中在crylcry2中相對于野生型下調的有9箇蛋白,其他蛋白均錶現為上調.這些在白光處理下差異錶達的蛋白質主要是參與碳水化閤物代謝、能量代謝、細胞組織結構、牴抗壓力和解毒、蛋白質的摺疊和細胞壁的形成等功能,而且亞細胞定位主要是在葉綠體和線粒體.對其中5箇蛋白質點的基因進行瞭半定量RT-PCR分析,髮現這幾箇蛋白質點的錶達與基因的錶達基本一緻.這些分析結果錶明光控製擬南芥的髮育是通過共調節許多相關基因的錶達而實現的.
은화소시식물적람광수체,재식물중조절다충광형태건성,포괄억제하배축적신장、자협적신전화조절식물적개화시간등,단은화소의뢰람광조절광형태건성적분자궤제잉연불청초.채용쌍향응효전영대생장재백광하적의남개은화소쌍돌변체급야생형적유묘전단백진행분리,통과고마사량람염색,획득료분변솔화중복성교호적쌍향전영도보.선취료55개차이단백질점채용MALDI-TOF-TOF-MS진행태질보지문도분석,최종유33개단백질점득도료가고감정.기중재crylcry2중상대우야생형하조적유9개단백,기타단백균표현위상조.저사재백광처리하차이표체적단백질주요시삼여탄수화합물대사、능량대사、세포조직결구、저항압력화해독、단백질적절첩화세포벽적형성등공능,이차아세포정위주요시재협록체화선립체.대기중5개단백질점적기인진행료반정량RT-PCR분석,발현저궤개단백질점적표체여기인적표체기본일치.저사분석결과표명광공제의남개적발육시통과공조절허다상관기인적표체이실현적.
