基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2009年
7期
737-741
,共5页
王月圆%高云周%汪兆琦%沈岩%佟伟民
王月圓%高雲週%汪兆琦%瀋巖%佟偉民
왕월원%고운주%왕조기%침암%동위민
基因敲除%PARP-1%髓母细胞瘤细胞%神经标记物
基因敲除%PARP-1%髓母細胞瘤細胞%神經標記物
기인고제%PARP-1%수모세포류세포%신경표기물
目的 建立表达PARP-1和P53基因双缺失的小鼠髓母细胞瘤细胞系,为研究髓母细胞瘤(MB)发生机制提供细胞模型.方法 对小鼠髓母细胞瘸细胞进行原代培养,体外传代观察,传代30次以上对培养细胞进行形态学观察及细胞标志性蛋白的免疫荧光分析,用Western blot法检测PARP-1蛋白的表达,用含有PARP-1蛋白功能区域的重组质粒pEGFP-Cl-Hparp-1和绿色荧光蛋白空质粒PEGFP-Cl转染细胞进行检测.结果 新建立的小鼠髓母细胞瘤细胞系呈多角形、短梭形,免疫荧光分析可见未成熟神经元标志性蛋白Vimentin、Dcx、βⅢ-Tubulin等表达阳性,Western blot 检测PARP-1蛋白阴性,导入外源PAPR-1基因后星阳性.结论 成功建立了DNA损伤修复蛋白功能缺陷的小脑神经源性髓母细胞瘤细胞系,有助于深入研究髓母细胞瘤的病因及发病机制.
目的 建立錶達PARP-1和P53基因雙缺失的小鼠髓母細胞瘤細胞繫,為研究髓母細胞瘤(MB)髮生機製提供細胞模型.方法 對小鼠髓母細胞瘸細胞進行原代培養,體外傳代觀察,傳代30次以上對培養細胞進行形態學觀察及細胞標誌性蛋白的免疫熒光分析,用Western blot法檢測PARP-1蛋白的錶達,用含有PARP-1蛋白功能區域的重組質粒pEGFP-Cl-Hparp-1和綠色熒光蛋白空質粒PEGFP-Cl轉染細胞進行檢測.結果 新建立的小鼠髓母細胞瘤細胞繫呈多角形、短梭形,免疫熒光分析可見未成熟神經元標誌性蛋白Vimentin、Dcx、βⅢ-Tubulin等錶達暘性,Western blot 檢測PARP-1蛋白陰性,導入外源PAPR-1基因後星暘性.結論 成功建立瞭DNA損傷脩複蛋白功能缺陷的小腦神經源性髓母細胞瘤細胞繫,有助于深入研究髓母細胞瘤的病因及髮病機製.
목적 건립표체PARP-1화P53기인쌍결실적소서수모세포류세포계,위연구수모세포류(MB)발생궤제제공세포모형.방법 대소서수모세포가세포진행원대배양,체외전대관찰,전대30차이상대배양세포진행형태학관찰급세포표지성단백적면역형광분석,용Western blot법검측PARP-1단백적표체,용함유PARP-1단백공능구역적중조질립pEGFP-Cl-Hparp-1화록색형광단백공질립PEGFP-Cl전염세포진행검측.결과 신건립적소서수모세포류세포계정다각형、단사형,면역형광분석가견미성숙신경원표지성단백Vimentin、Dcx、βⅢ-Tubulin등표체양성,Western blot 검측PARP-1단백음성,도입외원PAPR-1기인후성양성.결론 성공건립료DNA손상수복단백공능결함적소뇌신경원성수모세포류세포계,유조우심입연구수모세포류적병인급발병궤제.
