中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2009年
9期
50-54
,共5页
张春玲%宗先伟%杨文超%张敬梅%彭明义%程宝艳%余为一
張春玲%宗先偉%楊文超%張敬梅%彭明義%程寶豔%餘為一
장춘령%종선위%양문초%장경매%팽명의%정보염%여위일
猪瘟病毒%E2蛋白%单克隆抗体%鉴定
豬瘟病毒%E2蛋白%單剋隆抗體%鑒定
저온병독%E2단백%단극륭항체%감정
应用分子克隆技术将猪瘟病毒E2蛋白部分基因插入到载体pGEX-4T-1中构建重组质粒pGEX-4T-E(A),在大肠杆菌Rosetta中表达融合蛋白GST-E(A),以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经克隆化和间接ELISA筛选,获得了C3、A1两株稳定分泌抗猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA结果显示,其腹水效价为1:128000和1:256000.Western blotting结果证实,单克隆抗体C3和A1能与猪瘟病毒(classical swinefever virus,CSFV)发生特异性的反应,表明该单抗是针对猪瘟病毒E2蛋白的保守线性表位.
應用分子剋隆技術將豬瘟病毒E2蛋白部分基因插入到載體pGEX-4T-1中構建重組質粒pGEX-4T-E(A),在大腸桿菌Rosetta中錶達融閤蛋白GST-E(A),以純化的融閤蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾細胞與骨髓瘤細胞SP2/0進行融閤,經剋隆化和間接ELISA篩選,穫得瞭C3、A1兩株穩定分泌抗豬瘟病毒E2蛋白單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,ELISA結果顯示,其腹水效價為1:128000和1:256000.Western blotting結果證實,單剋隆抗體C3和A1能與豬瘟病毒(classical swinefever virus,CSFV)髮生特異性的反應,錶明該單抗是針對豬瘟病毒E2蛋白的保守線性錶位.
응용분자극륭기술장저온병독E2단백부분기인삽입도재체pGEX-4T-1중구건중조질립pGEX-4T-E(A),재대장간균Rosetta중표체융합단백GST-E(A),이순화적융합단백면역BALB/c소서,취기비세포여골수류세포SP2/0진행융합,경극륭화화간접ELISA사선,획득료C3、A1량주은정분비항저온병독E2단백단극륭항체적잡교류세포주,ELISA결과현시,기복수효개위1:128000화1:256000.Western blotting결과증실,단극륭항체C3화A1능여저온병독(classical swinefever virus,CSFV)발생특이성적반응,표명해단항시침대저온병독E2단백적보수선성표위.
