动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2011年
6期
91-95
,共5页
猪流感病毒%DNA疫苗%分子佐剂C3d
豬流感病毒%DNA疫苗%分子佐劑C3d
저류감병독%DNA역묘%분자좌제C3d
为了构建融合表达分子佐剂猪补体C3d与猪流感病毒血凝素(HA)的真核表达载体,论文克隆了猪C3d全长基因与H3N2亚型猪流感病毒的HA基因,并构建了包含3拷贝的C3d和经过改造的HA(替换信号肽并去除跨膜区)的质粒pHA-C3d3.序列分析表明,获得的猪C3d与参考序列相比核苷酸同源性达到99.7%,氨基酸同源性达99.3%.受体结合功能区p28氨基酸序列与参考序列完全一致.猪补体C3d的氨基酸序列与鼠、牛、羊、人的同源性都在80%以上,而与鸡的同源性仅为62.5%.受体结合功能区p28氨基酸序列与鼠、牛、羊、人有4～7个氨基酸的不同,而与鸡有17个氨基酸的不同,表明哺乳动物C3d与禽类有明显的差别.质粒DNA pHA-C3d3转染293T细胞后,Western blot分析显示,在细胞裂解产物中检测到了与预期大小一致的特异性条带,说明融合蛋白得到了表达.为进一步探讨C3d分子佐剂及猪流感DNA疫苗的研究奠定了基础.
為瞭構建融閤錶達分子佐劑豬補體C3d與豬流感病毒血凝素(HA)的真覈錶達載體,論文剋隆瞭豬C3d全長基因與H3N2亞型豬流感病毒的HA基因,併構建瞭包含3拷貝的C3d和經過改造的HA(替換信號肽併去除跨膜區)的質粒pHA-C3d3.序列分析錶明,穫得的豬C3d與參攷序列相比覈苷痠同源性達到99.7%,氨基痠同源性達99.3%.受體結閤功能區p28氨基痠序列與參攷序列完全一緻.豬補體C3d的氨基痠序列與鼠、牛、羊、人的同源性都在80%以上,而與鷄的同源性僅為62.5%.受體結閤功能區p28氨基痠序列與鼠、牛、羊、人有4～7箇氨基痠的不同,而與鷄有17箇氨基痠的不同,錶明哺乳動物C3d與禽類有明顯的差彆.質粒DNA pHA-C3d3轉染293T細胞後,Western blot分析顯示,在細胞裂解產物中檢測到瞭與預期大小一緻的特異性條帶,說明融閤蛋白得到瞭錶達.為進一步探討C3d分子佐劑及豬流感DNA疫苗的研究奠定瞭基礎.
위료구건융합표체분자좌제저보체C3d여저류감병독혈응소(HA)적진핵표체재체,논문극륭료저C3d전장기인여H3N2아형저류감병독적HA기인,병구건료포함3고패적C3d화경과개조적HA(체환신호태병거제과막구)적질립pHA-C3d3.서렬분석표명,획득적저C3d여삼고서렬상비핵감산동원성체도99.7%,안기산동원성체99.3%.수체결합공능구p28안기산서렬여삼고서렬완전일치.저보체C3d적안기산서렬여서、우、양、인적동원성도재80%이상,이여계적동원성부위62.5%.수체결합공능구p28안기산서렬여서、우、양、인유4～7개안기산적불동,이여계유17개안기산적불동,표명포유동물C3d여금류유명현적차별.질립DNA pHA-C3d3전염293T세포후,Western blot분석현시,재세포렬해산물중검측도료여예기대소일치적특이성조대,설명융합단백득도료표체.위진일보탐토C3d분자좌제급저류감DNA역묘적연구전정료기출.
