中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2004年
2期
183-188
,共6页
陈培拉%季永镛%常智杰%张淑平%孙兵%傅新元%刘力
陳培拉%季永鏞%常智傑%張淑平%孫兵%傅新元%劉力
진배랍%계영용%상지걸%장숙평%손병%부신원%류력
糖皮质激素受体%协同抑制因子%人源CDC50%克隆与表达
糖皮質激素受體%協同抑製因子%人源CDC50%剋隆與錶達
당피질격소수체%협동억제인자%인원CDC50%극륭여표체
糖皮质激素受体(GR)为一种特异性配体诱导的转录因子在机体发育、生理及行为等过程中发挥重要作用.这一过程往往受到转录协同调节因子的控制,包括协同抑制因子或协同激活因子的作用.克隆了人源双跨膜受体分子,并命名为hCDC50.该分子编码区有1 056 bp,与鼠源基因mCDC50在核苷酸水平有90%一致性.将hCDC50蛋白的164～317编码序列与GST融合构建原核表达质粒进行重组蛋白的表达与纯化并制备多抗.用二维双向扩散检测抗体为阳性,抗原的滴度为125μg/ml.体外翻译研究显示该基因编码蛋白约为40 kD,与Western检测在动物细胞中的表达一致.用hCDC50真核表达质粒与GR萤光报告系统共转染COS-7细胞显示,hCDC50对GR信号转导有明显的抑制作用,其对GR信号通路的抑制作用达3～4倍以上.hCDC50可能为一个新的协同抑制因子,在抑制GR的转录激活过程中起作用.
糖皮質激素受體(GR)為一種特異性配體誘導的轉錄因子在機體髮育、生理及行為等過程中髮揮重要作用.這一過程往往受到轉錄協同調節因子的控製,包括協同抑製因子或協同激活因子的作用.剋隆瞭人源雙跨膜受體分子,併命名為hCDC50.該分子編碼區有1 056 bp,與鼠源基因mCDC50在覈苷痠水平有90%一緻性.將hCDC50蛋白的164～317編碼序列與GST融閤構建原覈錶達質粒進行重組蛋白的錶達與純化併製備多抗.用二維雙嚮擴散檢測抗體為暘性,抗原的滴度為125μg/ml.體外翻譯研究顯示該基因編碼蛋白約為40 kD,與Western檢測在動物細胞中的錶達一緻.用hCDC50真覈錶達質粒與GR螢光報告繫統共轉染COS-7細胞顯示,hCDC50對GR信號轉導有明顯的抑製作用,其對GR信號通路的抑製作用達3～4倍以上.hCDC50可能為一箇新的協同抑製因子,在抑製GR的轉錄激活過程中起作用.
당피질격소수체(GR)위일충특이성배체유도적전록인자재궤체발육、생리급행위등과정중발휘중요작용.저일과정왕왕수도전록협동조절인자적공제,포괄협동억제인자혹협동격활인자적작용.극륭료인원쌍과막수체분자,병명명위hCDC50.해분자편마구유1 056 bp,여서원기인mCDC50재핵감산수평유90%일치성.장hCDC50단백적164～317편마서렬여GST융합구건원핵표체질립진행중조단백적표체여순화병제비다항.용이유쌍향확산검측항체위양성,항원적적도위125μg/ml.체외번역연구현시해기인편마단백약위40 kD,여Western검측재동물세포중적표체일치.용hCDC50진핵표체질립여GR형광보고계통공전염COS-7세포현시,hCDC50대GR신호전도유명현적억제작용,기대GR신호통로적억제작용체3～4배이상.hCDC50가능위일개신적협동억제인자,재억제GR적전록격활과정중기작용.
