CAJ | 학술논문

目的:制备羟基磷灰石/聚乳酸聚乙醇酸骨修复材料,并对其进行生物学评价.方法:实验于2006-06/2007-02在中科院长春应用化学研究所完成材料制备,在吉林大学基础医学院实验动物中心完成动物实验.将低聚乳酸的羧基与羟基磷灰石表面的钙原子用化学键连接,得到表面接枝聚左旋乳酸的羟基磷灰石,将其与聚乳酸聚乙醇酸共混,得到复合材料PLLA-g-HA/PLGA.溶于氯仿后铺膜(厚0.2 mm),用DMEM培养液浸泡材料膜制备浸提液.首先,进行材料生物安全性实验:①细胞毒性实验:将浸提液与培养液混合,接种兔成骨细胞,培养24 h,MT T法检测细胞增殖,计算细胞增殖率和细胞毒性级(细胞毒性级0或1级为合格).②全身毒性实验:小鼠以50 mL/kg的剂量静脉注射浸提液,观察72 h内小鼠中毒症状.③皮肤刺激实验:兔脊柱两侧皮内注射材料浸提液,观察72 h内皮肤有无异常反应.④热原实验:白兔耳缘静脉注入浸提液(10 mL/kg).注射后每0.5 h测肛温1次,共6次,以6次中最高的1次减去正常体温,计为升高度数.其次,对复合材料进行细胞黏附性检测:将复合材料制成1%氯仿溶液,涂于硅化的盖玻片上,置于6孔板,每孔接种1×105个成骨细胞,培养3 d,在2,24,72 h行FITC荧光染色,数码摄像系统拍摄细胞荧光照片.结果:制备了新型PLLA-g-HA/PLGA复合材料.①生物安全性实验结果:MTT实验检测复合材料细胞增殖率为94.8%,细胞毒性级为1级;全身毒性实验中动物无死亡、惊厥、瘫痪、呼吸抑制、腹泻和体质量下降等不良反应;热原实验中兔体温最大的变化值是0.25℃(国家标准为＜0.6℃);皮肤刺激实验中未见任何刺激反应,无红斑、焦痂、水肿表现.②细胞黏附性实验结果:细胞接种后2 h可见少量细胞开始贴壁;24 h时可见贴壁细胞明显增多,并呈聚集生长;培养3 d后可见细胞逐渐融合,细胞状态良好.结论:新型PLLA-g-HA/PLGA复合材料符合生物材料细胞毒性要求,按毒性剂量分级属无毒级,无致热原性、对皮肤无刺激作用,具有良好的生物相容性和细胞黏附性. 目的:製備羥基燐灰石/聚乳痠聚乙醇痠骨脩複材料,併對其進行生物學評價.方法:實驗于2006-06/2007-02在中科院長春應用化學研究所完成材料製備,在吉林大學基礎醫學院實驗動物中心完成動物實驗.將低聚乳痠的羧基與羥基燐灰石錶麵的鈣原子用化學鍵連接,得到錶麵接枝聚左鏇乳痠的羥基燐灰石,將其與聚乳痠聚乙醇痠共混,得到複閤材料PLLA-g-HA/PLGA.溶于氯倣後鋪膜(厚0.2 mm),用DMEM培養液浸泡材料膜製備浸提液.首先,進行材料生物安全性實驗:①細胞毒性實驗:將浸提液與培養液混閤,接種兔成骨細胞,培養24 h,MT T法檢測細胞增殖,計算細胞增殖率和細胞毒性級(細胞毒性級0或1級為閤格).②全身毒性實驗:小鼠以50 mL/kg的劑量靜脈註射浸提液,觀察72 h內小鼠中毒癥狀.③皮膚刺激實驗:兔脊柱兩側皮內註射材料浸提液,觀察72 h內皮膚有無異常反應.④熱原實驗:白兔耳緣靜脈註入浸提液(10 mL/kg).註射後每0.5 h測肛溫1次,共6次,以6次中最高的1次減去正常體溫,計為升高度數.其次,對複閤材料進行細胞黏附性檢測:將複閤材料製成1%氯倣溶液,塗于硅化的蓋玻片上,置于6孔闆,每孔接種1×105箇成骨細胞,培養3 d,在2,24,72 h行FITC熒光染色,數碼攝像繫統拍攝細胞熒光照片.結果:製備瞭新型PLLA-g-HA/PLGA複閤材料.①生物安全性實驗結果:MTT實驗檢測複閤材料細胞增殖率為94.8%,細胞毒性級為1級;全身毒性實驗中動物無死亡、驚厥、癱瘓、呼吸抑製、腹瀉和體質量下降等不良反應;熱原實驗中兔體溫最大的變化值是0.25℃(國傢標準為＜0.6℃);皮膚刺激實驗中未見任何刺激反應,無紅斑、焦痂、水腫錶現.②細胞黏附性實驗結果:細胞接種後2 h可見少量細胞開始貼壁;24 h時可見貼壁細胞明顯增多,併呈聚集生長;培養3 d後可見細胞逐漸融閤,細胞狀態良好.結論:新型PLLA-g-HA/PLGA複閤材料符閤生物材料細胞毒性要求,按毒性劑量分級屬無毒級,無緻熱原性、對皮膚無刺激作用,具有良好的生物相容性和細胞黏附性.
목적:제비간기린회석/취유산취을순산골수복재료,병대기진행생물학평개.방법:실험우2006-06/2007-02재중과원장춘응용화학연구소완성재료제비,재길림대학기출의학원실험동물중심완성동물실험.장저취유산적최기여간기린회석표면적개원자용화학건련접,득도표면접지취좌선유산적간기린회석,장기여취유산취을순산공혼,득도복합재료PLLA-g-HA/PLGA.용우록방후포막(후0.2 mm),용DMEM배양액침포재료막제비침제액.수선,진행재료생물안전성실험:①세포독성실험:장침제액여배양액혼합,접충토성골세포,배양24 h,MT T법검측세포증식,계산세포증식솔화세포독성급(세포독성급0혹1급위합격).②전신독성실험:소서이50 mL/kg적제량정맥주사침제액,관찰72 h내소서중독증상.③피부자격실험:토척주량측피내주사재료침제액,관찰72 h내피부유무이상반응.④열원실험:백토이연정맥주입침제액(10 mL/kg).주사후매0.5 h측항온1차,공6차,이6차중최고적1차감거정상체온,계위승고도수.기차,대복합재료진행세포점부성검측:장복합재료제성1%록방용액,도우규화적개파편상,치우6공판,매공접충1×105개성골세포,배양3 d,재2,24,72 h행FITC형광염색,수마섭상계통박섭세포형광조편.결과:제비료신형PLLA-g-HA/PLGA복합재료.①생물안전성실험결과:MTT실험검측복합재료세포증식솔위94.8%,세포독성급위1급;전신독성실험중동물무사망、량궐、탄탄、호흡억제、복사화체질량하강등불량반응;열원실험중토체온최대적변화치시0.25℃(국가표준위＜0.6℃);피부자격실험중미견임하자격반응,무홍반、초가、수종표현.②세포점부성실험결과:세포접충후2 h가견소량세포개시첩벽;24 h시가견첩벽세포명현증다,병정취집생장;배양3 d후가견세포축점융합,세포상태량호.결론:신형PLLA-g-HA/PLGA복합재료부합생물재료세포독성요구,안독성제량분급속무독급,무치열원성、대피부무자격작용,구유량호적생물상용성화세포점부성.