现代生物医学进展
現代生物醫學進展
현대생물의학진전
PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE
2008年
4期
612-615,607
,共5页
林小娟%黄薇薇%赵梅%姜俊芬%郭凌晨%吴明媛%韩伟
林小娟%黃薇薇%趙梅%薑俊芬%郭凌晨%吳明媛%韓偉
림소연%황미미%조매%강준분%곽릉신%오명원%한위
GST-hDSL%Notch通路%造血祖细胞
GST-hDSL%Notch通路%造血祖細胞
GST-hDSL%Notch통로%조혈조세포
目的:原核表达DSL与谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白并研究观察GST-hDSL对人脐带血CD34+造血祖细胞的体外扩增作用.方法:将人DSL cDNA的蛋白编码序列克隆入原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌DH5α中诱导表达融合蛋白,用DEAE阴离子交换柱纯化目的蛋白.然后分离、纯化脐带血CD34+造血祖细胞,不加细胞因子或加入SCF(干细胞生长因子,stem cell factor)和GM-CSF(粒-巨噬细胞集落刺激因子,granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor),经过14天的培养,检测GST-hDSL对细胞总数、CD34+细胞百分率、以及集落形成的影响.结果:当SCF和GM-CSF存在时,GST-hDSL组的CD34+细胞百分率,集落(colony forming cells,CFC)数以及高增值潜能集落(high proliferative potential colony forming cells,HPP-CFC)数分别是时照组的1.9、1.2、5.3倍.结论:当与SCF和GM-CSF联合作用时,重组GST-hDSL蛋白对造血祖细胞具有扩增作用.
目的:原覈錶達DSL與穀胱甘肽S轉移酶(GST)的融閤蛋白併研究觀察GST-hDSL對人臍帶血CD34+造血祖細胞的體外擴增作用.方法:將人DSL cDNA的蛋白編碼序列剋隆入原覈錶達載體pGEX-2T中,在大腸桿菌DH5α中誘導錶達融閤蛋白,用DEAE陰離子交換柱純化目的蛋白.然後分離、純化臍帶血CD34+造血祖細胞,不加細胞因子或加入SCF(榦細胞生長因子,stem cell factor)和GM-CSF(粒-巨噬細胞集落刺激因子,granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor),經過14天的培養,檢測GST-hDSL對細胞總數、CD34+細胞百分率、以及集落形成的影響.結果:噹SCF和GM-CSF存在時,GST-hDSL組的CD34+細胞百分率,集落(colony forming cells,CFC)數以及高增值潛能集落(high proliferative potential colony forming cells,HPP-CFC)數分彆是時照組的1.9、1.2、5.3倍.結論:噹與SCF和GM-CSF聯閤作用時,重組GST-hDSL蛋白對造血祖細胞具有擴增作用.
목적:원핵표체DSL여곡광감태S전이매(GST)적융합단백병연구관찰GST-hDSL대인제대혈CD34+조혈조세포적체외확증작용.방법:장인DSL cDNA적단백편마서렬극륭입원핵표체재체pGEX-2T중,재대장간균DH5α중유도표체융합단백,용DEAE음리자교환주순화목적단백.연후분리、순화제대혈CD34+조혈조세포,불가세포인자혹가입SCF(간세포생장인자,stem cell factor)화GM-CSF(립-거서세포집락자격인자,granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor),경과14천적배양,검측GST-hDSL대세포총수、CD34+세포백분솔、이급집락형성적영향.결과:당SCF화GM-CSF존재시,GST-hDSL조적CD34+세포백분솔,집락(colony forming cells,CFC)수이급고증치잠능집락(high proliferative potential colony forming cells,HPP-CFC)수분별시시조조적1.9、1.2、5.3배.결론:당여SCF화GM-CSF연합작용시,중조GST-hDSL단백대조혈조세포구유확증작용.
