生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2009年
1期
6-10
,共5页
霍希琴%颜鸿飞%李军%周兴旺%李伟%羊小海
霍希琴%顏鴻飛%李軍%週興旺%李偉%羊小海
곽희금%안홍비%리군%주흥왕%리위%양소해
分子信标%荧光分析%限制性内切酶
分子信標%熒光分析%限製性內切酶
분자신표%형광분석%한제성내절매
利用分子信标被切割后荧光信号的变化.发展了一种简便的检测限制性内切酶活性的新型荧光分析方法.以限制性内切酶Xsp I为例.将其识别位点嵌入具有茎环结构的分子信标探针(Molecular Beacon,MB)的环状部分,利用这种分子信标在溶液中形成的瞬时二聚体结构,实现了限制性内切酶对分子信标的切割.在优化的条件下,反应初速度与酶的浓度成正比,线性范围为0.05～50 U/mL,检测限为0.05 U/mL.通过改变分子信标环部的识别位点的序列.还可以检测其他限制性内切酶如Alu I的活性.
利用分子信標被切割後熒光信號的變化.髮展瞭一種簡便的檢測限製性內切酶活性的新型熒光分析方法.以限製性內切酶Xsp I為例.將其識彆位點嵌入具有莖環結構的分子信標探針(Molecular Beacon,MB)的環狀部分,利用這種分子信標在溶液中形成的瞬時二聚體結構,實現瞭限製性內切酶對分子信標的切割.在優化的條件下,反應初速度與酶的濃度成正比,線性範圍為0.05～50 U/mL,檢測限為0.05 U/mL.通過改變分子信標環部的識彆位點的序列.還可以檢測其他限製性內切酶如Alu I的活性.
이용분자신표피절할후형광신호적변화.발전료일충간편적검측한제성내절매활성적신형형광분석방법.이한제성내절매Xsp I위례.장기식별위점감입구유경배결구적분자신표탐침(Molecular Beacon,MB)적배상부분,이용저충분자신표재용액중형성적순시이취체결구,실현료한제성내절매대분자신표적절할.재우화적조건하,반응초속도여매적농도성정비,선성범위위0.05～50 U/mL,검측한위0.05 U/mL.통과개변분자신표배부적식별위점적서렬.환가이검측기타한제성내절매여Alu I적활성.
