生殖医学杂志
生殖醫學雜誌
생식의학잡지
JOURNAL OF REPRODUCTIVE MEDICINE
2010年
4期
342-346
,共5页
绿茶提取物%人卵巢癌SKOV3细胞%凋亡%雌激素受体%芳香化酶
綠茶提取物%人卵巢癌SKOV3細胞%凋亡%雌激素受體%芳香化酶
록다제취물%인란소암SKOV3세포%조망%자격소수체%방향화매
目的 探讨绿茶提取物(green tea extract,GTE)对人卵巢癌SKOV3细胞生长抑制作用及其作用途径.方法 SKOV3细胞的培养液内添加GTE,培养后,应用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测SKOV3细胞的生长曲线;免疫细胞化学法检测细胞抗凋亡蛋白酶(Bcl-xl)、细胞凋亡蛋白酶(Caspase-3)等凋亡相关蛋白的表达;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、芳香化酶(aromatase)等蛋白的表达水平.结果 MTT法显示,培养液内添加不同浓度GTE均能明显抑制SKOV3细胞生长(P<0.05),且呈明显的浓度依赖性;免疫细胞化学法显示,培养液内添加GTE 80 μg/L作用24 h后,SKOV3细胞中Bcl-xl蛋白的平均吸光度(A)值为(0.228±0.032),与对照组(0.303±0.014)相比显著下调(P<0.01),Caspase-3蛋白平均A值为(0.193±0.043),与对照组(0.135±0.030)相比明显上调(P<0.05);Western blotting法显示,经GTE(40、80 μg/L)作用24 h后,SKOV3细胞中ERα、aromatase的蛋白表达明显下调,ERα与内参β-肌动蛋白(β-actin)的比值分别为(0.665±0.042)、(0.208±0.020),与对照组(0.846±0.046)相比均显著降低(P<0.01),aromatase与β-actin的比值分别为(0.251±0.030)、(0.129±0.054),与对照组(0.728±0.026)相比亦均显著降低(P<0.01);ERβ蛋白的表达明显上调,其与β-actin的比值为(0.322±0.081)、(0.735±0 032),与对照组(0.098±0.039)相比显著升高(P<0.01).结论 GTE在体外能有效抑制SKOV3细胞的生长与增值,其作用机制可能与诱导SKOV3细胞凋亡,并可下调ERα、aromatase蛋白的表达水平,上调ERβ蛋白的表达水平有关.
目的 探討綠茶提取物(green tea extract,GTE)對人卵巢癌SKOV3細胞生長抑製作用及其作用途徑.方法 SKOV3細胞的培養液內添加GTE,培養後,應用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法檢測SKOV3細胞的生長麯線;免疫細胞化學法檢測細胞抗凋亡蛋白酶(Bcl-xl)、細胞凋亡蛋白酶(Caspase-3)等凋亡相關蛋白的錶達;蛋白免疫印跡法(Western blotting)檢測雌激素受體α(ERα)、雌激素受體β(ERβ)、芳香化酶(aromatase)等蛋白的錶達水平.結果 MTT法顯示,培養液內添加不同濃度GTE均能明顯抑製SKOV3細胞生長(P<0.05),且呈明顯的濃度依賴性;免疫細胞化學法顯示,培養液內添加GTE 80 μg/L作用24 h後,SKOV3細胞中Bcl-xl蛋白的平均吸光度(A)值為(0.228±0.032),與對照組(0.303±0.014)相比顯著下調(P<0.01),Caspase-3蛋白平均A值為(0.193±0.043),與對照組(0.135±0.030)相比明顯上調(P<0.05);Western blotting法顯示,經GTE(40、80 μg/L)作用24 h後,SKOV3細胞中ERα、aromatase的蛋白錶達明顯下調,ERα與內參β-肌動蛋白(β-actin)的比值分彆為(0.665±0.042)、(0.208±0.020),與對照組(0.846±0.046)相比均顯著降低(P<0.01),aromatase與β-actin的比值分彆為(0.251±0.030)、(0.129±0.054),與對照組(0.728±0.026)相比亦均顯著降低(P<0.01);ERβ蛋白的錶達明顯上調,其與β-actin的比值為(0.322±0.081)、(0.735±0 032),與對照組(0.098±0.039)相比顯著升高(P<0.01).結論 GTE在體外能有效抑製SKOV3細胞的生長與增值,其作用機製可能與誘導SKOV3細胞凋亡,併可下調ERα、aromatase蛋白的錶達水平,上調ERβ蛋白的錶達水平有關.
목적 탐토록다제취물(green tea extract,GTE)대인란소암SKOV3세포생장억제작용급기작용도경.방법 SKOV3세포적배양액내첨가GTE,배양후,응용갑기새서기사서(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)비색법검측SKOV3세포적생장곡선;면역세포화학법검측세포항조망단백매(Bcl-xl)、세포조망단백매(Caspase-3)등조망상관단백적표체;단백면역인적법(Western blotting)검측자격소수체α(ERα)、자격소수체β(ERβ)、방향화매(aromatase)등단백적표체수평.결과 MTT법현시,배양액내첨가불동농도GTE균능명현억제SKOV3세포생장(P<0.05),차정명현적농도의뢰성;면역세포화학법현시,배양액내첨가GTE 80 μg/L작용24 h후,SKOV3세포중Bcl-xl단백적평균흡광도(A)치위(0.228±0.032),여대조조(0.303±0.014)상비현저하조(P<0.01),Caspase-3단백평균A치위(0.193±0.043),여대조조(0.135±0.030)상비명현상조(P<0.05);Western blotting법현시,경GTE(40、80 μg/L)작용24 h후,SKOV3세포중ERα、aromatase적단백표체명현하조,ERα여내삼β-기동단백(β-actin)적비치분별위(0.665±0.042)、(0.208±0.020),여대조조(0.846±0.046)상비균현저강저(P<0.01),aromatase여β-actin적비치분별위(0.251±0.030)、(0.129±0.054),여대조조(0.728±0.026)상비역균현저강저(P<0.01);ERβ단백적표체명현상조,기여β-actin적비치위(0.322±0.081)、(0.735±0 032),여대조조(0.098±0.039)상비현저승고(P<0.01).결론 GTE재체외능유효억제SKOV3세포적생장여증치,기작용궤제가능여유도SKOV3세포조망,병가하조ERα、aromatase단백적표체수평,상조ERβ단백적표체수평유관.