浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2011年
1期
57-63
,共7页
陆晓凤%王良静%周群燕%姒健敏
陸曉鳳%王良靜%週群燕%姒健敏
륙효봉%왕량정%주군연%사건민
RNA,小分子干扰%再生/遗传学%基因表达%胃肿瘤%遗传载体%质粒%细胞凋亡%细胞增殖%转染
RNA,小分子榦擾%再生/遺傳學%基因錶達%胃腫瘤%遺傳載體%質粒%細胞凋亡%細胞增殖%轉染
RNA,소분자간우%재생/유전학%기인표체%위종류%유전재체%질립%세포조망%세포증식%전염
目的:探讨小RNA干扰(small interfering RNA,RNAi)对胃癌细胞株RegIα基因表达的抑制作用及对细胞增殖和凋亡的影响.方法:RT-PCR检测6株胃癌细胞的RegIα基因mRNA表达水平;体外构建RegIα基因小RNA干扰的重组质粒,分别稳定转染RegIα高表达细胞株MKN45和AGS,并设空载体作为对照组;应用RT-PCR和Western blot测定转染后细胞RegIα基因及其蛋白的表达水平;应用MTT法和流式细胞仪检测RegIα小RNA干扰对细胞增殖抑制率和凋亡的影响.结果:RT-PCR显示:与空载体组相比,转染RegIα小RNA干扰质粒后,MKN45和AGS细胞的RegIαmRNA明显被抑制;Western blot结果显示:MKN45和AGS细胞的RegIα蛋白表达水平分别降低至空载体组的(44±4)%和(25±4)%;MTT结果显示:RegIα小RNA干扰后MKN45和AGS细胞增殖均受到抑制,凋亡率分别为(12.96±0.50)%和(11.59±1.10)%,与空载体组比差异有统计学意义(P<0.05).结论:小RNA干扰可有效抑制胃癌细胞株中RegIα基因的表达,具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的重要作用.
目的:探討小RNA榦擾(small interfering RNA,RNAi)對胃癌細胞株RegIα基因錶達的抑製作用及對細胞增殖和凋亡的影響.方法:RT-PCR檢測6株胃癌細胞的RegIα基因mRNA錶達水平;體外構建RegIα基因小RNA榦擾的重組質粒,分彆穩定轉染RegIα高錶達細胞株MKN45和AGS,併設空載體作為對照組;應用RT-PCR和Western blot測定轉染後細胞RegIα基因及其蛋白的錶達水平;應用MTT法和流式細胞儀檢測RegIα小RNA榦擾對細胞增殖抑製率和凋亡的影響.結果:RT-PCR顯示:與空載體組相比,轉染RegIα小RNA榦擾質粒後,MKN45和AGS細胞的RegIαmRNA明顯被抑製;Western blot結果顯示:MKN45和AGS細胞的RegIα蛋白錶達水平分彆降低至空載體組的(44±4)%和(25±4)%;MTT結果顯示:RegIα小RNA榦擾後MKN45和AGS細胞增殖均受到抑製,凋亡率分彆為(12.96±0.50)%和(11.59±1.10)%,與空載體組比差異有統計學意義(P<0.05).結論:小RNA榦擾可有效抑製胃癌細胞株中RegIα基因的錶達,具有抑製細胞增殖和誘導細胞凋亡的重要作用.
목적:탐토소RNA간우(small interfering RNA,RNAi)대위암세포주RegIα기인표체적억제작용급대세포증식화조망적영향.방법:RT-PCR검측6주위암세포적RegIα기인mRNA표체수평;체외구건RegIα기인소RNA간우적중조질립,분별은정전염RegIα고표체세포주MKN45화AGS,병설공재체작위대조조;응용RT-PCR화Western blot측정전염후세포RegIα기인급기단백적표체수평;응용MTT법화류식세포의검측RegIα소RNA간우대세포증식억제솔화조망적영향.결과:RT-PCR현시:여공재체조상비,전염RegIα소RNA간우질립후,MKN45화AGS세포적RegIαmRNA명현피억제;Western blot결과현시:MKN45화AGS세포적RegIα단백표체수평분별강저지공재체조적(44±4)%화(25±4)%;MTT결과현시:RegIα소RNA간우후MKN45화AGS세포증식균수도억제,조망솔분별위(12.96±0.50)%화(11.59±1.10)%,여공재체조비차이유통계학의의(P<0.05).결론:소RNA간우가유효억제위암세포주중RegIα기인적표체,구유억제세포증식화유도세포조망적중요작용.