中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2011年
4期
293-296
,共4页
坍塌反应调节蛋白1%基因克隆%真核表达载体
坍塌反應調節蛋白1%基因剋隆%真覈錶達載體
담탑반응조절단백1%기인극륭%진핵표체재체
目的 构建人坍塌反应调节蛋白1(CRMP-1)基因表达载体,以研究CRMP-1蛋白在目的细胞中的生物学功能.方法 从购买的人胚肾细胞株293T中提取总RNA,经过RT-PCR方法扩增含人CRMP-1基因的全长cDNA,将CRMP-1基因开放阅读框(ORF)cDNA序列,克隆到真核表达载体p3x-FLAG-myc-CMV-24中,构建真核表达质粒CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24.以酶切和基因序列测定方法鉴定重组质粒CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24的正确性.结果 酶切鉴定和基因序列测定均证实重组质粒CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24构建正确.结论 成功构建人CRMP-1基因真核表达载体.
目的 構建人坍塌反應調節蛋白1(CRMP-1)基因錶達載體,以研究CRMP-1蛋白在目的細胞中的生物學功能.方法 從購買的人胚腎細胞株293T中提取總RNA,經過RT-PCR方法擴增含人CRMP-1基因的全長cDNA,將CRMP-1基因開放閱讀框(ORF)cDNA序列,剋隆到真覈錶達載體p3x-FLAG-myc-CMV-24中,構建真覈錶達質粒CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24.以酶切和基因序列測定方法鑒定重組質粒CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24的正確性.結果 酶切鑒定和基因序列測定均證實重組質粒CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24構建正確.結論 成功構建人CRMP-1基因真覈錶達載體.
목적 구건인담탑반응조절단백1(CRMP-1)기인표체재체,이연구CRMP-1단백재목적세포중적생물학공능.방법 종구매적인배신세포주293T중제취총RNA,경과RT-PCR방법확증함인CRMP-1기인적전장cDNA,장CRMP-1기인개방열독광(ORF)cDNA서렬,극륭도진핵표체재체p3x-FLAG-myc-CMV-24중,구건진핵표체질립CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24.이매절화기인서렬측정방법감정중조질립CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24적정학성.결과 매절감정화기인서렬측정균증실중조질립CRMP-1-p3x-FLAG-myc-CMV-24구건정학.결론 성공구건인CRMP-1기인진핵표체재체.