河北医科大学学报
河北醫科大學學報
하북의과대학학보
JOURNAL OF HEBEI MEDICAL UNIVERSITY
2012年
1期
8-11
,共4页
洪承吕%王本极%杨德业%张怀勤
洪承呂%王本極%楊德業%張懷勤
홍승려%왕본겁%양덕업%장부근
高血压%腺病毒科%基因%大鼠
高血壓%腺病毒科%基因%大鼠
고혈압%선병독과%기인%대서
目的 构建携带SLC7A8基因的重组腺病毒载体,为进一步研究SLC7A8基因的功能作准备.方法 含SLC7A8目的 基因编码序列(coding domain sequence,CDS)的互补DNA(complementary DNA,cDNA)的pGEM-T Easy载体测序分析正确后,再将其连接入重组腺病毒载体.以双酶切和测序鉴定正确后,将pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体转染大鼠肾小管上皮细胞(rat renal tubular epithelial cells-52e,NRK-52E),流式细胞仪测定转染效率,反转录聚合酶链反应法检测转染后SLC7A8 mRNA的表达.结果 pAdxsi- GFP-SLC7A8重组腺病毒载体构建成功,流式细胞仪测定重组腺病毒载体转染NRK-52E效率为94.1%,且证实转染后肾小管上皮细胞的SLC7A8 mRNA表达.结论 本研究成功构建pAdxsi-GFP-SLC7A8重组腺病毒载体,并成功转染NRK-52E细胞,这为我们进一步探索SLC7A8基因的生物学功能奠定了基础.
目的 構建攜帶SLC7A8基因的重組腺病毒載體,為進一步研究SLC7A8基因的功能作準備.方法 含SLC7A8目的 基因編碼序列(coding domain sequence,CDS)的互補DNA(complementary DNA,cDNA)的pGEM-T Easy載體測序分析正確後,再將其連接入重組腺病毒載體.以雙酶切和測序鑒定正確後,將pAdxsi-GFP-SLC7A8重組腺病毒載體轉染大鼠腎小管上皮細胞(rat renal tubular epithelial cells-52e,NRK-52E),流式細胞儀測定轉染效率,反轉錄聚閤酶鏈反應法檢測轉染後SLC7A8 mRNA的錶達.結果 pAdxsi- GFP-SLC7A8重組腺病毒載體構建成功,流式細胞儀測定重組腺病毒載體轉染NRK-52E效率為94.1%,且證實轉染後腎小管上皮細胞的SLC7A8 mRNA錶達.結論 本研究成功構建pAdxsi-GFP-SLC7A8重組腺病毒載體,併成功轉染NRK-52E細胞,這為我們進一步探索SLC7A8基因的生物學功能奠定瞭基礎.
목적 구건휴대SLC7A8기인적중조선병독재체,위진일보연구SLC7A8기인적공능작준비.방법 함SLC7A8목적 기인편마서렬(coding domain sequence,CDS)적호보DNA(complementary DNA,cDNA)적pGEM-T Easy재체측서분석정학후,재장기련접입중조선병독재체.이쌍매절화측서감정정학후,장pAdxsi-GFP-SLC7A8중조선병독재체전염대서신소관상피세포(rat renal tubular epithelial cells-52e,NRK-52E),류식세포의측정전염효솔,반전록취합매련반응법검측전염후SLC7A8 mRNA적표체.결과 pAdxsi- GFP-SLC7A8중조선병독재체구건성공,류식세포의측정중조선병독재체전염NRK-52E효솔위94.1%,차증실전염후신소관상피세포적SLC7A8 mRNA표체.결론 본연구성공구건pAdxsi-GFP-SLC7A8중조선병독재체,병성공전염NRK-52E세포,저위아문진일보탐색SLC7A8기인적생물학공능전정료기출.
