标记免疫分析与临床
標記免疫分析與臨床
표기면역분석여림상
LABELED IMMUNOASSAYS AND CLINICAL MEDICINE
2004年
4期
204-207
,共4页
常艳%薛毅珑%潘静坤%田磊%高宇红%郭水龙
常豔%薛毅瓏%潘靜坤%田磊%高宇紅%郭水龍
상염%설의롱%반정곤%전뢰%고우홍%곽수룡
骨形态发生蛋白%神经干细胞%诱导%胆碱能
骨形態髮生蛋白%神經榦細胞%誘導%膽堿能
골형태발생단백%신경간세포%유도%담감능
本文观察骨形态发生蛋白4(BMP4)在体外对原代分离培养的大鼠脑神经干细胞(NSCs)的胆碱能诱导分化效应.将从两月龄大鼠脑海马、纹状体等区域分离的细胞, 培养于含EGF和bFGF的DMEM/F12培养液中, 在光镜下观察细胞的形态特征, 并行nestin免疫细胞化学染色.24h后, 一半细胞改换成含有BMP4的培养液培养作为实验组, 另一半细胞继续用原培养液培养作为对照组.在培养第8天, 采用间接免疫荧光染色, 观察培养细胞的胆碱乙酰转移酶(ChAT)抗原的表达.结果表明实验组呈ChAT阳性的细胞较多, 发出较强的绿色荧光, 具有神经元的形态特征;对照组呈ChAT阳性的细胞较少, 发出的荧光较弱.另外行FITC标记的流式细胞术, 检测NSCs的分化、结果表明实验组有16%的细胞呈ChAT阳性,而对照组只有约7%.由此认为BMP4具有诱导NSCs分化成具有胆碱能特性的细胞的功能.
本文觀察骨形態髮生蛋白4(BMP4)在體外對原代分離培養的大鼠腦神經榦細胞(NSCs)的膽堿能誘導分化效應.將從兩月齡大鼠腦海馬、紋狀體等區域分離的細胞, 培養于含EGF和bFGF的DMEM/F12培養液中, 在光鏡下觀察細胞的形態特徵, 併行nestin免疫細胞化學染色.24h後, 一半細胞改換成含有BMP4的培養液培養作為實驗組, 另一半細胞繼續用原培養液培養作為對照組.在培養第8天, 採用間接免疫熒光染色, 觀察培養細胞的膽堿乙酰轉移酶(ChAT)抗原的錶達.結果錶明實驗組呈ChAT暘性的細胞較多, 髮齣較彊的綠色熒光, 具有神經元的形態特徵;對照組呈ChAT暘性的細胞較少, 髮齣的熒光較弱.另外行FITC標記的流式細胞術, 檢測NSCs的分化、結果錶明實驗組有16%的細胞呈ChAT暘性,而對照組隻有約7%.由此認為BMP4具有誘導NSCs分化成具有膽堿能特性的細胞的功能.
본문관찰골형태발생단백4(BMP4)재체외대원대분리배양적대서뇌신경간세포(NSCs)적담감능유도분화효응.장종량월령대서뇌해마、문상체등구역분리적세포, 배양우함EGF화bFGF적DMEM/F12배양액중, 재광경하관찰세포적형태특정, 병행nestin면역세포화학염색.24h후, 일반세포개환성함유BMP4적배양액배양작위실험조, 령일반세포계속용원배양액배양작위대조조.재배양제8천, 채용간접면역형광염색, 관찰배양세포적담감을선전이매(ChAT)항원적표체.결과표명실험조정ChAT양성적세포교다, 발출교강적록색형광, 구유신경원적형태특정;대조조정ChAT양성적세포교소, 발출적형광교약.령외행FITC표기적류식세포술, 검측NSCs적분화、결과표명실험조유16%적세포정ChAT양성,이대조조지유약7%.유차인위BMP4구유유도NSCs분화성구유담감능특성적세포적공능.
